第一部分 SD大鼠尾椎椎间盘退变模型的建立。 目的：建立大鼠尾椎椎间盘退变模型比较造模后一周、造模后两周两组椎间盘病理学的变化。 方法：选取20只体重(250±20)g的SD大鼠，应用针刺注射生物酶的方法建立尾椎的退变模型，分别于建模后一周取其中10只作为I组，两周后取其中10只大鼠为Ⅱ组。Ⅰ、Ⅱ组尾椎间盘应用HE染色和Alcian blue染色通过病理评分的方法进行比较。 结果：Ⅰ组可以发现在HE染色中，原本完整的髓核中产生了空腔，空腔的形态不规则，空腔内壁相对连续。周围的纤维环结构相对完整但是产生了褶皱，在Alcian blue染色中，相对于髓核的位置蓝染比较明显没有明显的褪色。Ⅱ组HE染色中，髓核出现了不规则破碎。周围的纤维环结构断裂屈曲，层状结构几乎完全消失。Alcian blue染色中，髓核位置的蓝染出现了较明显的褪色。病理学的评分提示Ⅰ组评分明显高于Ⅱ组。 结论：造模后椎间盘退变程度随时间延长而加重，造模一周后椎间盘的组织学形态更接近于正常的椎间盘，类似于人类椎间盘退变的Ⅰ～Ⅱ级，造模两周后椎间盘结构形态类似于人类椎间盘退变的Ⅲ～Ⅳ级，从髓核，纤维环，Alcain blue三组数据的病理评分可以证实此论点，造模后一周更接近椎间盘早期退变的特点，所以我们也选择在造模后一周进行进一步的细胞移植实验。 第二部分 大鼠骨髓间充质干细胞的分离纯化传代及鉴定。 目的：体外分离纯化大鼠BMSCs对其进行传代培养，并鉴定细胞性质。 　　方法：应用贴壁筛选法分离BMSCs，置入培养瓶中培养，传代三次后应用流式细胞仪对于其进行表面抗原的鉴定。 结果：细胞接种后可见到大个、圆形、折光性强的BMSCs散在分布。24h后细胞已贴壁。72h后细胞分裂、增殖成10个左右细胞团，一周后产生细胞集落并开始融合，铺满培养瓶后传代，传代后细胞呈均匀分布生长，增殖速度加快，生长均匀，排列规则，3d左右可以传代一次。总共传代三次后，细胞形态基本一致，呈长梭形，折光性强，细胞边界清楚，核饱满居中，细胞的排列有一定的方向性。细胞鉴定结果提示，大鼠骨髓间质干细胞表面抗原CD29,CD44,CD90,CD105显示阳性，而表面抗原CD34,CD45,CD11b为阴性，组织相容性复合体Ⅰ、Ⅱ均为阴性。 结论：利用贴壁筛选法培养大鼠BMSCs，经过传代后可以成生纯度较高的BMSCs，其生长性状稳定，可作为组织工程的种子细胞。 第三部分骨髓间充质干细胞与透明质酸钠混合液修复早期退变椎间盘的作用目的：建立大鼠尾椎椎间盘退变模型，于其退变早期，在无外源性生长因子以及细胞支架的作用下，移植BMSCs与透明质酸钠(sodium hyaluronate，SH)混合液入实验组椎间盘，比较其在影像学、病理组织学及对应成分的RNA表达上与对照组的差别。 方法：选取20只大鼠，将其尾椎三个相邻的椎间盘由近至远分为细胞植入组、椎间盘退变组、正常对照组三组。其中细胞植入组、椎间盘退变组注射生物酶造模，正常对照组注射对照试剂。一周后于细胞植入组组注射BMSCs-SH混合溶液，三周后通过X-ray，病理切片，RT-PCR比较三组的差别。 结果：影像学结果提示正常对照组保持了正常的椎间盘高度，细胞植入组、椎间盘退变组的椎间隙高度明显降低。病理学显示在椎间盘退变组移植细胞在髓核内增殖分化产生了大量的蛋白多糖成分部分维持了椎间盘的形态和结构。RT-PCR提示细胞植入组的Ⅱ型胶原及蛋白聚糖的mRNA表达接近于正常对照组而明显高于椎间盘退变组。 结论：在椎间盘高度的维持上细胞植入组与椎间盘退变组并没有明显的差别，提示在四周之内细胞植入对于椎间盘高度的恢复并没有明显的作用。而在病理学评分和RT-PCR表达上细胞植入组明显高于椎间盘退变组，与正常对照组接近，提示在无外源性生长因子及细胞支架作用下移植BMSCs的方法修复较早期的退变椎间盘是简单而有效的。