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菲(Phenanthrene,PHE)是由三个苯环连接的多环芳烃化合物(Polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs),能够引起动物各组织和脏器的损伤,还与人类一些器官的癌变相关。热休克蛋白(Heat shock proteins,HSPs)是机体处在不利环境中诱导合成的抗逆性相关蛋白。本实验以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)为实验材料,通过静水实验法测定菲对泥鳅的半致死浓度和安全浓度,继而测定泥鳅在菲的胁迫下性腺指数(GSI)的变化;采用实时荧光定量的方法探究在菲1.29 mg/L、1.67 mg/L、2.16 mg/L、2.79 mg/L浓度下分别胁迫7d、14 d、21 d、28 d时,雄性泥鳅肝脏和精巢组织、雌性泥鳅肝脏和卵巢组织中HSP90α和HSP90β的m RNA表达情况以及在菲的四个浓度处理组胁迫7 d时性腺HSP70的表达变化,为进一步深入研究泥鳅热休克蛋白基因提供重要参考依据,并为水体环境中对菲污染的监测提供理论基础和科学依据。结论如下:1.菲胁迫泥鳅24 h、48 h、72 h、96 h的LC50分别为54.95、33.11、25.12、14.79 mg/L,安全浓度为3.61 mg/L,对泥鳅表现为高毒物质。2.菲胁迫对雌性泥鳅GSI有明显的影响,对卵巢发育有显著的诱导作用;对泥鳅精巢的发育有一定的抑制作用。3.HSP90α、HSP90β以及HSP70在泥鳅肝脏以及性腺组织中均有表达,且表达量均不同,具有组织特异性。4.菲胁迫下,泥鳅精巢中HSP90α表达量显著上升,HSP90β的表达量显著下降,推测有外源雌激素输入时在精巢中的雌激素信号通路(HSP90-ER-E-VTG)中起作用的是HSP90α。雄性泥鳅肝脏HSP90α表达被诱导,HSP90β的表达先被抑制继而被诱导,推测HSP90α的显著变化与菲的雌激素效应以及HSP90α的应激性相关,在胁迫后期HSP90β可能参与了菲在泥鳅体内的代谢机制,在肝脏雌激素信号通路中起作用。5.菲胁迫下,卵巢HSP90α的表达被抑制,HSP90β的表达先被抑制后又被诱导,雌性肝脏中HSP90α和HSP90β的变化趋势与卵巢一致,可能是菲作为外源雌激素打破机体内原有激素平衡,对雌激素信号通路产生负反馈,进而导致HSP90α的表达下降,胁迫后期HSP90β在肝脏雌激素信号通路中起作用。6.菲胁迫下,HSP70在泥鳅精巢和卵巢中均显著上调,可能是较低剂量的菲胁迫浓度就可以促进泥鳅性腺细胞凋亡,诱导HSP70大量表达产生一个应激响应,随着菲胁迫浓度的增加,菲对泥鳅性腺细胞凋亡的促进作用减弱。综上,3个基因的表达变化在反映机体的适应和保护机制的同时也证明机体已经发生应激性损伤,因此HSP90α、HSP90β以及HSP70在菲胁迫下的变化可以作为菲对泥鳅生物毒性评价的参考内容。