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目的:初步明确三颗针对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠作用,并从调节内源性代谢物和肠道菌群多样性的角度初步探讨其作用机制。方法:(1)将60只c57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组及三颗针低、中、高剂量组,每组10只;正常组自由饮水,其余各组连续饮用2.5%DSS(Dextran sulfate sodium salt,DSS)溶液7 d复制小鼠UC模型。从造模的第1 d起,各组按0.2 ml/10 g灌胃体积给予对应药物干预,正常组和模型组给予等体积蒸馏水。每日观察并计算小鼠体重变化率、疾病活动指数评分,于第11 d收集小鼠血清、盲肠内容物、结肠。记录每组小鼠结肠长度;采用苏木精-伊红染色观察小鼠结肠病理变化;采用ELISA法检测小鼠结肠组织TNF-α、IL-6及IL-10的含量。(2)通过超高效液相-飞行时间质谱技术检测小鼠血清与粪便中内源性代谢物,对质谱数据降噪、对齐、提取及归一化处理后,采用主成分分析和正交偏最小二乘判别分析对血清和粪便的代谢轮廓进行表征,根据变异权重投影值大于1,组间差异倍数大于1.5或小于0.67、P<0.05筛选出潜在的差异代谢物及可能的代谢通路。(3)将肠道菌群总DNA以16S r RNA编码基因V3-V4区为目标序列进行PCR扩增,基于Illumina平台获得测序数据并进行群落结构、Alpha多样性、Beta多样性等分析三颗针对UC小鼠肠道菌群的组成和多样性的影响。结果:(1)三颗针可以显著改善UC小鼠的症状。与模型组相比,美沙拉嗪组及三颗针组小鼠体重显著增加(P<0.05),DAI评分显著降低(P<0.05),结肠长度显著增长(P<0.05),HE染色结果显示,正常组小鼠肠黏膜结构完整,杯状细胞正常分化;模型组小鼠结肠组织正常结构基本消失,黏膜层可见充血、水肿,炎性细胞弥漫性浸润,杯状细胞可见明显变形、减少;与模型组相比,美沙拉嗪组和三颗针中、高剂量组结构均较为完整,炎性细胞浸润较少,杯状细胞结构比较完整。与正常组相比,模型组TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.05),IL-10含量显著降低(P<0.05)。与模型组相比,美沙拉嗪组TNF-α、IL-6的含量显著降低(P<0.05),IL-10的含量显著升高(P<0.05);三颗针组TNF-α的含量降低,无统计学差异;三颗针高剂量组IL-10的含量显著升高(P<0.05),低、中剂量无统计学差异。(2)血清和粪便代谢轮廓分析结果表明,质控样本聚集较好,说明仪器精密度和稳定性良好;正常组、模型组和三颗针高剂量组聚集在95%的置信区间内,组内聚集良好,组间分离程度较高;给药干预后,三颗针高剂量组明显向正常组靠近。分别在血清中与粪便中鉴定出56、43个差异代谢物,主要属于脂质、氨基酸和脂肪酸等,经三颗针干预后,差异代谢物的水平逐渐向趋向正常。涉及到的代谢通路主要有苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,亚油酸代谢,苯丙氨酸代谢,甘油磷脂代谢等。(3)16S r RNA基因测序结果显示,三颗针可以调节UC模型小鼠肠道菌群状态。α多样性和β多样性分析表明正常组、模型组和三颗针组之间肠道菌群出现明显差异。进一步对菌群相对丰度分析发现,与正常组相比,模型组厚壁菌门和脱硫菌门相对丰度显著上调(P<0.05),弯曲菌门丰度显著下调(P<0.05);与模型组相比,三颗针组弯曲杆菌门相对丰度显著上调(P<0.05),厚壁菌门相对丰度显著下调(P<0.05)。在属水平上,与正常组相比,模型组螺杆菌属、Muribaculaceae属、理研菌属相对丰度显著下调(P<0.05),Odoribacter属相对丰度显著上调(P<0.05);与模型组相比,三颗针组螺杆菌属相对丰度显著上调(P<0.05),Odoribacter、另枝菌属、RikenellaceaeRC9gutgroup相对丰度显著下调(P<0.05)。结论:三颗针能够显著改善DSS诱导的UC小鼠症状,其机制可能与调节脂质代谢、氨基酸代谢、能量代谢,改善肠道菌群结构及多样性相关。