【摘 要】
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目的:本研究旨在探讨脂肪干细胞基质胶（stromal vascular fraction gel,SVF-gel）)联合CO2点阵激光治疗增生性瘢痕的疗效以及作用机制,为临床使用两种方法的联合治疗提供基础理论依据。方法:取4只成年雌性的新西兰大耳兔建立兔耳增生性瘢痕模型,麻醉后无菌条件下,在双侧兔耳腹侧做一个5.5cm X 1.5cm的全层皮肤缺损创面,4周后创面愈合,可见红色隆起,取瘢痕及正常皮
【基金项目】
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遵义医学院附属医院博士启动基金（院字[2018]10）号； 遵义市优秀青年基金项目（遵时科合HZ字[2019]49）号； 国家自然科学基金（81801921）；
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目的:本研究旨在探讨脂肪干细胞基质胶（stromal vascular fraction gel,SVF-gel）)联合CO2点阵激光治疗增生性瘢痕的疗效以及作用机制,为临床使用两种方法的联合治疗提供基础理论依据。方法:取4只成年雌性的新西兰大耳兔建立兔耳增生性瘢痕模型,麻醉后无菌条件下,在双侧兔耳腹侧做一个5.5cm X 1.5cm的全层皮肤缺损创面,4周后创面愈合,可见红色隆起,取瘢痕及正常皮肤行HE染色,鉴定增生性瘢痕模型。取14只制备兔SVF-gel,麻醉后无菌条件下,获取双侧腹股沟脂肪垫,洗涤、剪碎、离心、反复推注、再次离心,收集最下层即为兔SVF-gel。取24只兔共制备48个瘢痕模型,随机分为四组,每组12个:联合组（SVF-gel+CO2点阵激光）、SVF-gel组、CO2点阵激光组（以下简称激光组）和对照组。治疗前、治疗后第4周、8周、12周采用数码相机拍摄瘢痕照片,观察瘢痕外观变化。治疗后第4周和第12周取瘢痕组织行组织学检测,并进一步研究成脂信号PPAR-γ和C/EBP-αm RNA和蛋白的表达。采用方差分析对结果进行两两比较。结果:1.成功建立兔耳增生性瘢痕模型,HE染色可见兔耳瘢痕真皮明显较正常皮肤增厚,差异有统计学意义（P<0.01）。2.数码相机记录不同时间点瘢痕外观的变化。第4周,对比对照组和激光组,联合组和SVF-gel组的瘢痕变平、质地变柔软,体积缩小;第8周,各组瘢痕增生范围进一步缩小,联合组改善最明显;第12周,联合组瘢痕质地、厚度及色泽最接近正常皮肤,而对照组仍可见僵硬且明显隆起的瘢痕。3.HE染色显示,第4周,对照组可见真皮呈扁平状、网状隆起,炎性细胞浸润,但联合组和SVF-gel组炎症相对较轻;第12周,联合组的真皮厚度最薄,炎性细胞浸润最少,皮肤结构层次更清晰,但对照组几乎没有改善。4.Masson染色显示,第4周,联合组和SVF-gel组胶原排列较激光组和对照组有序,间隙增宽（P<0.05）;第12周,联合组胶原排列最疏松、规则,而对照组仍可见致密且杂乱无序的胶原纤维（P<0.05）。5.I型胶原免疫组化染色显示,联合组的I型胶原染色弱阳性,对照组的I型胶原染色强阳性,联合组的I型胶原表达显著低于SVF-gel组、激光组和对照组（P<0.05）。6.围脂滴蛋白（perilipin）免疫荧光染色显示,在第4周和12周,联合组阳性表达最强,其次是SVF-gel组和激光组,对照组perilipin阳性表达最低（P<0.05）。7.qPCR和Western Blot检测结果显示,在第4周和第12周,联合组C/EBP-α和PPAR-γm RNA和蛋白表达水平显著高于其他三组,不同时间点各组间差异具有统计学意义。结论:SVF-gel移植联合CO2点阵激光治疗可拮抗增生性瘢痕形成,机制可能与其促进瘢痕内成脂、重塑细胞外基质有关。
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