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目的中枢神经损伤后,由于激活过度的炎症反应,往往引发继发性损伤,导致中枢神经损伤加重[1]。损伤信号通过调节炎症细胞产生炎症反应在继发性损伤中发挥了重要作用,但损伤后不断增殖的星形胶质细胞是否也介导了炎症反应尚不清楚[2]。本文拟研究脊髓损伤后促炎因子MIF和星形胶质细胞炎症反应之间的关系及其分子调控机制。方法成年雄性SD(Sprague Dawley)大鼠进行脊髓(T8-T10)砸伤,构建脊髓损伤模型;脊髓损伤后0d,1d,4d,7d时间点进行灌注取材;Western blot、免疫荧光等检测脊髓损伤后MIF表达情况;取新生1天的SD大鼠的脊髓星形胶质细胞体外原代培养,用MIF重组蛋白处理细胞,Real-time PCR检测TNF-α、IL-1β等炎症因子及其相关通路分子的表达变化;采用siRNA干扰MIF受体CD74,并进行转录组测序和生物信息学分析;通过Real-time PCR以及Western blot检测相关分子表达并进行验证,分析MIF调控星形胶质细胞炎症反应的信号机制。结果1.MIF在脊髓损伤后,4d表达水平最高,7d表达下降;2.MIF刺激星形胶质细胞,TNF-α、IL-1β、NF-k B表达上调;用siRNA干扰CD74后,TNF-α、IL-1β、NF-k B表达下调;3.分别用MIF重组蛋白和CD74 siRNA处理星形胶质细胞,MIF刺激24h后的p-Erk上调,CD74siRNA处理细胞并用MIF刺激24h后p-Erk表达下调;4.转录组测序分析,MIF调控星形胶质细胞ch25h和pla2g2a的表达5.Ed U细胞增殖结果显示,MIF促进星形胶质细胞增殖,且呈浓度依赖性。结论1.MIF上调星形胶质细胞炎症因子的表达,并且通过MIF/CD74调控轴发挥作用;2.MIF激活星形胶质细胞Erk通路;3.MIF促进星形胶质细胞增殖。