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目的:尝试一种微型载体——微滴，在不添加冷冻保护剂的情况下进行精子玻璃化冷冻，探讨微滴法无保护剂玻璃化冷冻精子的可行性，为临床保存微量精子提供一条可选择的思路。比较无冷冻保护剂的玻璃化冷冻法与常规慢速冷冻法对人精子冷冻复苏效果的影响，为临床优选适宜的冷冻方法提供实验依据。 方法:30份不育患者的精液标本，上游制备后分别进行常规慢速冷冻和微滴法无保护剂的玻璃化冷冻，比较精子冷冻前后的运动状态、形态和DNA的完整性。 结果: 1、与冷冻前精子相比，常规慢速冷冻和无保护剂的玻璃化冷冻这两种方法保存复苏后a级、b级、a+b+c级精子百分率均明显下降(P＜0.01)，VCL、VSL、VAP、MAD、ALH、BCF、LIN、STR均显著低于冷冻前(P＜0.01);两种冷冻方法复苏后虽然a+b+c级精子百分率比较无差异(P＞0.05)，但a级、b级精子百分率玻璃化冷冻组显著高于常规慢速冷冻组(P＜0.01，P＜0.05)，反映活动精子运动方式的参数STR、LIN玻璃化冷冻组也明显高于常规慢速冷冻组(P＜0.01)。 2、与冷冻前精子相比，常规慢速冷冻方法复苏后形态正常精子百分率明显下降(P＜0.01)，形态异常精子百分率明显上升(P＜0.01)，其中尤以头部异常率上升明显(P＜0.05);无保护剂的玻璃化冷冻方法保存复苏后形态正常精子百分率比较差异无显著性(P＞0.05)。这两种冷冻方法复苏后，形态正常精子百分率玻璃化冷冻组明显高于常规慢速冷冻组(P＜0.01)。 3、与冷冻前精子相比，常规慢速冷冻和无保护剂的玻璃化冷冻这两种冷冻方法保存复苏后精子核DNA完整性降低均显著下降(P＜0.01，P＜0.05)。这两种冷冻方法复苏后比较亦有显著性差异(P＜0.01)，常规慢速冷冻复苏后精子核DNA完整性降低较玻璃化冷冻组明显。 结论:无保护剂的玻璃化法冷冻保存精子是可行的，虽然与冷冻前相比，复苏后的前向活动精子百分数和精子核DNA的完整性均有所下降，但较之常规慢速冷冻保存方法，对于精子运动状态、形态及精子核DNA的完整性的不良影响要小一些，其差别具有统计学意义。且用这种方法冷冻精子简单、快速，不需专门的冷冻设备，微型载体承载微量体积，尤为适用于微量精子的冻存。故而，无保护剂的玻璃化冷冻法将成为冷冻精子的又一选择，为临床微量精子的冷冻提供了一条新的思路。