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B细胞的功能异常与多种自身免疫疾病的产生具有极为密切的联系,目前干预B细胞的手段主要包括小分子抑制剂和抗体,虽然在部分自身免疫疾病中显示出良好的效果,但仍存在一定限制性,亟需发展干预B细胞功能的新策略和新手段。核酸类药物能在基因水平发挥作用,在疾病(包括自身免疫疾病)治疗中具有巨大潜力:小干扰RNA可特异性沉默靶基因并且其沉默效果高、毒副作用较小;而CRISPR/Cas9基因编辑技术能在基因组水平上实现精准的分子修饰、干预基因表达。利用纳米递送载体输送小干扰RNA、CRISPR/Cas9基因编辑系统等进入B细胞并干预其功能有望治疗多种自身免疫疾病。大量研究表明表面特性(包括PEG密度、电荷等)会显著影响纳米载体与免疫细胞的互相作用,合理调控特性有望改善纳米载体干预免疫细胞功能的能力并提高疗效。在本项目中,在我们实验室前期发展的阳离子脂质辅助的纳米载体(CLAN)的基础上,通过改变纳米颗粒的组成和组分等实现对纳米颗粒特性的调控,构建由一系列表面特性不同(表面电荷、PEG密度等)纳米载体的构成的纳米载体库。我们发现不同特性纳米载体在静脉注射后与骨髓、淋巴结和脾脏等脾重要免疫器官中多种B细胞亚群的相互作用存在显著差异,并从纳米颗粒库中筛选出B细胞摄取能力最强的纳米颗粒。我们证明遴选出的CLAN能将CRISPR/Cas9基因编辑系统递送至B细胞中并表达Cas9蛋白。同时我们选取对B细胞的存活和功能至关重要的B细胞活化因子受体BAFF-R作为治疗靶点,静脉注射携载BAFF-R的siRNA的纳米载体能有效干扰B细胞中BAFF-R表达。本研究将为B细胞功能的干预和B细胞参与疾病的治疗提供新的思路,同时为其他种类免疫细胞功能的干预提供参考。