【摘 要】
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真核mRNA 3UTR和其结合蛋白的相互作用,在基因表达和调控中起重要作用.在大肠杆菌TG1中,通过5〔-P〕UTP标记的NF IL-6 3U TR作探针,工作人员发现了一种NF IL-16 3UTR结
【机 构】
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中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
【出 处】
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中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学
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真核mRNA 3UTR和其结合蛋白的相互作用,在基因表达和调控中起重要作用.在大肠杆菌TG1中,通过5〔-<32>P〕UTP标记的NF IL-6 3U TR作探针,工作人员发现了一种NF IL-16 3UTR结合蛋白,其分子量位于66-97KD之间.RNA凝胶阻滞实验和紫外交联分析表明,该蛋白结合NF IL-6 3UTR是非常专一的.为鉴定该蛋白,工作人员采取一系列步骤:从大肠杆菌TG1中粗提蛋白,硫酸安分级沉淀,离子交换层析,RNA亲和层析进行分离纯化.纯化后的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳转到PVDF膜上,Ponceau S染色后割下专一结合蛋白条带,测其N-端氨基酸序列如下:Ala-Thr-Arg-Ile-Glu-Phe-His-Gly-Gys-Gly.经过检索大肠杆菌蛋白库、人蛋白库及Gene Bank,均未发现高同源性的相关序列,此结果初步提示该蛋白是一个新蛋白.
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