胶质瘤抑制候选基因 2（Glioma tumour-suppressor candidate region gene 2,GLTSCR2）基因位于人类肿瘤抑制功能区域19号染色体上,编码分子量为60kDa的细胞蛋白。在肿瘤学中有广泛的研究,但在病毒学领域中的功能尚不清楚。本研究探索GLTSCR2调控Ⅰ型干扰素的产生及细胞抗病毒应答的分子机制,以揭示GLTSCR2在病毒复制中的作用。本研究首先采用基因沉默或过表达细胞中的GLTSCR2基因,通过荧光定量PCR、病毒效价测定以及免疫印迹试验,发现GLTSCR2蛋白与病毒的复制直接相关。进一步的GLTSCR2截短体、突变体试验表明GLTSCR2羧基末端330-432位氨基酸,特别是出核位点氨基酸对病毒的复制促进作用至关重要。病毒感染或poly（I:C）刺激可引起GLTSCR2的细胞定位发生改变:从细胞核移位到细胞质中,而出核位点缺失的GLTSCR2则不能迁移出核,无论是否有病毒感染。为了探索GLTSCR2在促进病毒复制的机理,我们采用双荧光素酶报告系统试验,发现GLTSCR2显著抑制IFN-β和NF-κB的活化,进一步运用免疫共沉淀和荧光素酶试验,结果表明GLTSCR2,特别是羧基末端GLTSCR2靶向RIG-Ⅰ,并非MAVS、TBK-1,因此负调控IFN-β的活化,而出核位点缺失的GLTSCR2则不能显著促进IFN-β的活化。为了揭示GLTSCR2负调控IFN-β产生的分子机制,进行了 GLTSCR2对RIG-Ⅰ磷酸化或泛素化突变体试验,结果表明GLTSCR2并非通过磷酸化RIG-Ⅰ负调控IFN-β的产生,而是通过特异性移除RIG-Ⅰ上K63偶联的泛素化链抑制RIG-Ⅰ的活化,从而负调控RIG-Ⅰ信号通路。进一步采用泛素化试验,结果表明GLTSCR2能通过USP15,并非USP3、USP21或TRIM25,进而去除RIG-Ⅰ上K63偶联的泛素化链,从而负调控RIG-Ⅰ活化和IFN-β的产生。最后,我们将GLTSCR2的截短体片段串联穿透肽,构建G4-TAT基因,进行原核表达,细胞试验结果表明,重组蛋白G4-TAT可以穿透细胞膜进入细胞,抑制Ⅰ型干扰素信号通路,负调控细胞抗病毒应答,因而利于病毒复制。综上所述,GLTSCR2可以促进病毒的复制,病毒的感染导致GLTSCR2从细胞核移位到细胞质中,并通过招募USP15去泛素化RIG-Ⅰ的K63位泛素化链负调RIG-Ⅰ的活化,从而负调控Ⅰ型干扰素的抗病毒应答。而GLTSCR2羧基末端原核表达蛋白亦能负调控Ⅰ型干扰素的产生从而促进病毒的复制。