瓜实绳Bactrocera cucurbitae(Coquillett)隶属双翅目 Diptera,实蝇科Tephritidae,果实蝇属BactraeeraMacquar,可为害寄主植物超过125种,是一种世界性检疫害虫,也是我国重要检疫性害虫之一。目前防治瓜实蝇最常用的方法是化学防治,但对环境和人类健康存在不良的影响,因此必须发展新型防治方法。运用遗传工程技术诱导昆虫性别失衡从而达到控制种群数量的目的,不失为一种瓜实蝇防治的新思路。性别决定基因transformer(tra)是许多性二型双翅目昆虫性别决定中的一个关键性基因,tra基因产生的功能性蛋白TRA与transformer 2(tra 2)基因产物TRA 2形成二聚体,调节级联反应中的下一个基因doublesex(dsx)进行雌性特异性剪接,产生雌性Dsx蛋白,从而促进雌性个体的发育。在瓜实蝇中,性别决定基因tra 已被分离和鉴定,但其性别决定机制尚未明确。本实验以瓜实蝇Bcutra为研究对象,采用RNAi技术进行胚胎显微注射Bcutra双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA),进而研究瓜实蝇Bcutra对性别发育的影响。实验结果如下:1、在未注射阴性对照和注射Venus dsRNA阳性对照处理组中,两者雌雄比例接近1:1。2、通过RNAi胚胎显微注射两个大小不同片段的BcutradsRNA均能获得90%以上的雄性成虫,说明Bcutra对瓜实蝇性别发育具有影响。3、经过RNAi雄虫生殖力的测试,注射Bcutra-384 dsRNA和Bcutra-738 dsRNA分别有45.0%和37.5%的雄虫能够与野生型雌虫发生交配,而产生可育后代的雄虫分别占37.5%和30%。4、随后对生殖力测试的所有雄虫进行解剖,在BcutradsRNA胚胎显微注射的部分间性个体中发现存在一个含有精巢和卵巢相连接的异常内生殖器,同时还发现在部分RNAi雄虫中精巢存在一大一小或两个都小的畸形现象。5、通过对RNAi未交配雄虫中Bcudsx基因的表达量分析,在RNAi未交配雄虫均检测到一条大小为1107 bp的Bcudsx雌性特异性转录本和一条大小为484 bp的Bcudsx雄特异性转录本,说明未发生交配的RNAi雄虫是不可育的假雄虫。本实验采用RNAi技术研究了瓜实蝇性别决定基因Bcutra对性别发育的影响。通过胚胎显微注射技术沉默瓜实蝇性别决定基因Bcutra,成功诱导XX雌性向雄性发生转化。研究结果不仅填补了瓜实蝇性别决定机制的空白,同时可为研发新型遗传工程防治方法防治瓜实蝇提供理论支撑和技术指导。