棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus，HearNPV)是杆状病毒GroupII的模式种之一，其基因组中的81号基因，HearNPV orf81，是一个功能未知的杆状病毒保守基因。orf81位于HearNPV G4株基因组74278-74766nt，开放阅读框全长489bp，预测编码蛋白大小约为19.0kDa。ha81起始密码子（ATG）的上游129nt存在有一个杆状病毒典型的晚期转录模体（ATAAG）。InterProScan分析结果表明该蛋白与杆状病毒中同源基因的氨基酸同源度仅为31-70%，属于功能未知的杆状病毒DUF682蛋白家族。利用野生型的HearNPV感染细胞后进行转录和表达时相的分析，结果表明ha81于6-12h开始有转录本出现，一直持续到96h，而蛋白则于12h能被检测到，持续表达至96h。上述结果表明ha81是杆状病毒的一个晚期基因。亚细胞定位结果显示，HA81主要分布在宿主细胞的细胞质中。为了进一步研究ha81的功能，利用Red重组系统成功构建了缺失ha81的突变病毒和异位补回ha81的重组病毒，将ha81缺失型病毒、ha81补回型病毒和野生型病毒分别转染HzAM1细胞后，病毒滴度检测结果显示ha81缺失型病毒出芽型病毒的产生几乎被完全阻断，而补回型病毒则与野生型具有相似的生长动力曲线。进一步的电镜观察分析发现，缺失ha81并没有影响到病毒粒子的装配，但却影响了病毒粒子从细胞核向细胞质的转运，从而导致出芽型病毒的产生被阻断。通过DNA复制曲线的测定，定量PCR结果显示三种病毒DNA的复制均起始于转染后0-12h，并且在0-24h内具有相似的复制曲线，而转染后24-96h ha81缺失型病毒同另外两种病毒间DNA拷贝数的巨大差异则主要是由于野生型病毒和ha81回复型病毒的二次感染引起，说明ha81并不参与HearNPV基因组的复制。为明确ha81对HearNPV其他基因转录是否存在影响，我们通过对ha81缺失型病毒和野生型病毒的上下游基因以及代表性的早晚期基因的转录情况做了比较，结果显示除其下有基因odv-e25外，ha81的缺失并不影响HearNPV其它基因的转录。进一步的研究结果显示odv-e25至少存在两个转录本，其中一个和ha81共同转录的转录本则由于ha81的缺失而被中断转录，而odv-e25仍然能够通过其自身的启动子启动转录。综上所述，ha81是HearNPV的一个与出芽型病毒形成相关的晚期必需基因，主要参与病毒核衣壳从细胞核到细胞质的转运。ha81删除并不影响病毒基因组DNA的复制和转录，但能够阻断出芽型病毒的产生。