高锰酸钾化学发光体系在蛋白质及酚类物质分析中的应用研究

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本论文的主要内容是对本实验室所建立的高良姜素-高锰酸钾-多聚磷酸(PPA)化学发光新体系的应用作了进一步拓展性的研究,基于人免疫球蛋白、邻苯二酚和茶多酚对该体系的增敏作用,结合流动注射技术,建立了测定人免疫球蛋白、邻苯二酚和茶多酚的流动注射化学发光分析方法(FI-CL),并对发光反应的机理进行了初步探讨。论文包括以下四个部分。第一部分流动注射化学发光分析法概述第一章流动注射化学发光分析法概述及高锰酸钾化学发光体系的研究进展介绍了流动注射技术、化学发光分析法的特点、基本原理及流动注射化学发光分析的发展趋势,重点总结了高锰酸钾化学发光体系的类型及其可能的发光机理,并展望了高锰酸钾化学发光体系的发展趋势。第二章流动注射化学发光法在生物分析中的研究进展总结和评述了流动注射化学发光法在氨基酸、蛋白质和免疫分析领域的应用,共引用文献33篇。第三章流动注射化学发光法在食品分析及环境中酚类物质分析中的研究进展总结和评述了近年来流动注射化学发光法在检测食品中微量元素、添加剂、农药、抗生素残留量、抗氧化性分析以及在环境酚类污染物定量测定等方面的应用,共引用文献52篇。第二部分高锰酸钾化学发光体系在蛋白质及酚类物质分析中的应用研究第四章流动注射化学发光法选择性测定人免疫球蛋白G含量人免疫球蛋白(IgG)及其常用防腐剂硫柳汞在高良姜素-高锰酸钾-多聚磷酸(PPA)体系中都能产生化学发光,结合流动注射技术,基于人lgG和硫柳汞的发光行为相互独立、且发光强度具有加和性的特点,本章通过在两个泵速下建立了有关人lgG和硫柳汞混合溶液的浓度对发光强度的两个方程,利用解方程组的方法首次实现了硫柳汞存在下对人lgG含量的选择性测定,同时也实现了对样品中硫柳汞含量的高灵敏度测定,建立了选择性测定人lgG的新方法。在最优条件下,化学发光强度ICL与人lgG的浓度在8.0×10-7-8.0×10-5g/mL范围内呈线性关系,与硫柳汞的浓度在1.0×10-7-2.0×10-6 g/mL范围内也呈线性关系对人lgG和硫柳汞的检测限分别为5.0×10-7 g/mL和6.0×10-8 g/mL,对1.0×10-5 g/mL的人lgG标准溶液和2.0×10-7 g/mL的硫柳汞标准溶液分别进行10次平行测定,相对标准偏差分别为0.8 %和2.0 %。该法简单、快速、灵敏,用于合成样的测定回收率在91.5-109.5 %之间。此外,本文对二者可能的发光机理也进行了初步探索。第五章流动注射化学发光法测定水中的邻苯二酚邻苯二酚在高良姜素-高锰酸钾-多聚磷酸(PPA)体系中能产生强的化学发光,据此结合流动注射技术,建立了一种测定邻苯二酚的流动注射化学发光(FI-CL)新方法。在最优条件下,相对化学发光强度的对数值与邻苯二酚浓度的对数值在2.0×10-8-1.0×10-6 mol·L-1和2.0×10-6-5.0×10-5 mol·L-1范围内呈良好的线性关系,检出限为1.0×10-8 mol·L-1 (3σ),相对标准偏差为1.2 % (1.0×10-6 mol·L-1邻苯二酚,n=11)。将该法应用于自来水、黄河水及实验室废水中邻苯二酚的测定,回收率在97.0%-105.3 %之间。同时初步探讨了该发光反应的机理。第六章流动注射化学发光法测定茶叶中的茶多酚在多聚磷酸(PPA)介质中,茶多酚对高良姜素-高锰酸钾体系的发光具有很强的增敏作用,据此结合流动注射技术,本章建立了一种测定茶多酚的流动注射化学发光(FI-CL)新方法。在最优条件下,相对化学发光强度的对数值与茶多酚浓度的对数值在1.0×10-8-5.0×10-6 g·mL-1范围内呈良好的线性关系,检出限为2.0×10-9 g·mL-1(3σ),相对标准偏差为2.0 % (1.0×10-6 g·mL-1茶多酚,n=10)。将该法应用于红茶、绿茶及铁观音中茶多酚含量的测定,回收率在96.0 %-107.5 %之间,并将此方法与茶多酚的国家标准测定方法作对比,结果令人满意。
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