艾滋病即获得性免疫缺陷综合征,自上世纪80年代被发现以来已经导致数百万人的死亡,其引发了严重公共卫生问题和社会问题。但是针对HIV的疫苗在相当长的一段时间内仍无取得突破的可能。故针对HIV的药物研发仍十分重要。目前高效抗逆转录病毒疗法已有众多药物如:逆转录酶抑制剂、整合酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和HIV进入抑制剂,通过两种以上的不同抑制剂的联合使用可以将HIV的复制抑制到检测不到的水平,但是随着越来越多的HIV耐药突变的出现,开发作用于HIV新靶点的药物就显得极其重要。Rev是HIV的调控蛋白之一,是HIV必不可少的蛋白之一,在HIV的生命周期中发挥极其重要的作用。在HIV生命周期后期,Rev可以募集宿主蛋白CRM1和RanGTP以及HIV转录生成的含有RRE（Rev response element）的HIV RNA序列（HIV基因组和mRNA）,从而形成HIV RNA转运复合物。整个复合物和核孔复合体结合,并由RanGTP水解GTP提供能量,即可将RNA转运出核,出核的RNA用于后续的翻译和病毒包装的过程。所以Rev-CRM1复合物被认为是HIV新型抑制剂的潜在靶点。计算机辅助药物设计自从上世纪90年代开发以来其理论日趋完善,通过计算机模拟的方法模拟受体和配体的相互作用,或者通过已知活性的配体的共同结构设计新的更有效的药物,已经成为药物设计的主要的方式。目前已经发展出了分子对接、药效团和QSAR等方法,尤其是分子对接已经成为新药设计所普遍采用的方法。我们在PDB数据库中得到了HIV Rev-CRM1相互作用的结构,选择并获得了中国天然产物库和NCI（National Cancer Institute）数据库共两个化合物库。本文通过分子对接的方法使用刚性对接和半柔性对接的策略,通过类药物规则和毒性预测等评价标准,最终从两个化合物库中共筛选并购买到了蜂斗菜酸等九个化合物。在细胞水平评价了这九种化合物的活性,结果显示其中三个化合物（蜂斗菜酸;72722-20-4;32886-40-1）均能不同程度的抑制HIV的复制水平,其中蜂斗菜酸的活性最好(EC₅₀:10.93μM;SI:28.36)。之后,我们通过DARTS（drug affinity responsive target stability）实验、TOA（Time of drug addition experiment）和生物膜干涉实验（Bio-layer interferometry,BLI）对药物的作用靶点进行了确定,发现这三个化合物均在HIV RNA的运输过程发挥作用且主要结合CRM1而不结合Rev蛋白。其中蜂斗菜酸可以在蛋白水平抑制HIV Rev-CRM1相互作用。综上所述,通过本文的研究我们获得了三个针对于Rev-CRM1靶点的具有抑制HIV活性的小分子化合物,相较于之前报道的化合物,这三个化合物的选择系数有了明显的提升,这些结果将有助于研发基于Rev-CRM1靶点的抗HIV药物。在后续研究中,我们将采用QSAR的方法对目前所有现存的Rev-CRM1抑制剂进行结构优化,期望得到活性更好且毒性更低的化合物。