【摘 要】
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近年来的研究提示,成体骨髓干细胞（adult bone marrow stem cell,ABMSC）能转分化为肝细胞。这一现象为临床上应用ABMSC移植治疗肝损伤和急慢性肝功能衰竭展示了一个可喜的前景。但是ABMSC向肝细胞分化的影响因素及分化的机制尚不十分清楚。我们课题组先前有关肝再生的研究资料和国内外有关研究进展提示,虽然肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HG
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近年来的研究提示,成体骨髓干细胞（adult bone marrow stem cell,ABMSC）能转分化为肝细胞。这一现象为临床上应用ABMSC移植治疗肝损伤和急慢性肝功能衰竭展示了一个可喜的前景。但是ABMSC向肝细胞分化的影响因素及分化的机制尚不十分清楚。我们课题组先前有关肝再生的研究资料和国内外有关研究进展提示,虽然肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）是启动肝细胞DNA合成的主要因子,但肝细咆的生长、分化和增殖要受到机体整体状态、以及肝外和肝内多种因子和某些激素等的调控,而肝大部切除术后的血清则可能包含全部刺激因子和营养成分。因此本课题应用肝大部切除鼠血清和/或HGF,进行ABMSC向肝细胞分化的体内外实验研究。 研究目的 1.应用肝大部切除鼠血清和/或HGF在体外诱导同系ABMSC向肝细胞分化,以探讨ABMSC向肝细胞前体分化和扩增的体外培养方法和条件。 2.诱导分化至一定阶段的大鼠ABMSC经不同途径（静脉注射、肝内注射和脾内注射）回输到同系大鼠肝损伤动物模型体内,观察其在体内向肝细胞分化以及参与肝组织重建的情况。 3.运用基因芯片技术对肝大部切除鼠血清诱导ABMSC向肝细胞分化的基因表达谱进行筛选,分析发生表达变化的基因,以期了解与ABMSC向肝细胞分化相关的特异性基因及它们之间的相互关系,从基因水平揭示了ABMSC向肝细胞分化中的分子机制。 研究方法 通过肝大部切除手术,制备肝再生动物模型,在术后24小时收集肝大部切除鼠血清。分离骨髓细胞体外培养,应用肝大部切除鼠血清诱导分化,利用免疫组化,RT-PCR,Western Blot等技术鉴定分化细胞。将已分化至一定阶段的肝前体细胞用CM-DiI进行标记后,回输到肝大部切除的肝再生动物模型体内,通过免疫组化和激光共聚焦显微镜等方法观察其在体内重建肝组织的情况。利用基因
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