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近年来鲍鱼养殖业大力发展,占鲍鱼质量1/5的下脚料却被大量的丢弃,这不仅污染了环境,同时也造成了资源的极大浪费。鲍鱼下脚料中含有大量的油脂、多糖、蛋白质等营养物质,可再利用的价值非常高。鉴于对鲍鱼内脏甾醇类化合物的研究较少,本文以鲍鱼内脏为研究对象,研究鲍鱼内脏甾醇的提取分离工艺,对比了PEF技术跟索氏提取法提取油脂对甾醇产量的影响,并对甾醇样品进行分析鉴定,用HPLC法测定了其中胆甾醇的含量。本文主要获得以下研究结果:(1)鲍鱼内脏油脂的提取工艺:采用高压脉冲电场法提取鲍鱼内脏油脂,通过对PEF提取鲍鱼内脏油脂的单因素实验,确定了单因素的优化条件范围,然后进行正交实验。PEF提取鲍鱼内脏油脂中的三个参数对油脂得率的影响依次为:电场强度>脉冲频率>脉冲个数,其最佳的提取工艺为:电场强度为30 kV/cm,脉冲个数为8个,脉冲频率为2700 Hz。(2)鲍鱼内脏甾醇的提取分离工艺:采用皂化和溶剂萃取结晶的方法从鲍鱼内脏油脂中提取鲍鱼内脏甾醇,鲍鱼内脏油脂用KOH-乙醇溶液皂化,不皂化物用石油醚萃取,旋转蒸发浓缩,干燥得甾醇粗品,后用乙醇重结晶,得精制的甾醇。此工艺中,皂化过程的最佳参数为:液料比为40:1,反应时间3h,皂化温度75℃,萃取剂用量为110mL,提取1次。结晶过程的最佳参数为:液料比为15:1,结晶温度为4℃,时间为24h。比较了用不同方法提取鲍鱼内脏油脂对甾醇产量的影响,得出PEF技术提取的鲍鱼内脏甾醇含量较索氏提取法提取的鲍鱼内脏甾醇含量高,进一步验证了PEF技术提取活性物质的可行性。(3)对鲍鱼内脏甾醇进行分析鉴定,确定其化合物结构。对鲍鱼内脏甾醇样品进行化学试剂特征显色法初步鉴定,符合特征显色,初步认为样品中含有甾醇。利用GC-MS对甾醇样品进行检测,与标准谱库比对后确定甾醇主要为胆甾醇。对鲍鱼内脏甾醇样品进行红外光谱分析,得到的甾醇特征峰清晰明确。采用HPLC测定鲍鱼内脏中胆甾醇的含量,方法简便,出峰时间短,精密度实验和回收率实验均较满意。测得的胆甾醇含量为:5mL鲍鱼内脏油脂中含有176.9mg的胆甾醇。