指数式富集的配体系统进化(SELEX)技术是近年来发展起来的研究核酸结构、功能及进化的一种新的组合化学技术。它在基础医学、临床诊断及药物筛选方面具有广泛的应用前景。本研究的目的是建立并完善随机RNA文库技术，并筛选牛凝血酶和噬菌体末端酶大亚基gp16特异结合的抑制性RNA配基，为新型药物筛选及抗病毒研究提供理论基础及实验依据。 本研究利用基因工程方法在大肠杆菌表达并纯化了T7RNA聚合酶，该酶具有很好的体外转录活性。1mg纯化的T7RNA聚合酶相当于250U Promega产品。我们采用全长68nt，随机区由25个碱基构成的RNA文库，筛选获得了与牛凝血酶特异结合的配基。配基高度富集为2条序列，它们与牛凝血酶的亲和力较高，解离常数分别为164nmol／L和240nmol／L。RNA配基能够体外抑制牛凝血酶的催化酶切活性，是作用在牛凝血酶的肝素结合位点上。对其进行结构分析表明，随机区形成的茎环结构是其发挥活性的结构基础。针对配基的基础结构设计并筛选到能够迅速逆转RNA配基生物活性的反义寡核苷酸拮抗剂。在以上研究工作基础上，又筛选了在噬菌体Φ29的基因组DNA组装过程中起重要作用的末端酶大亚基gp16特异结合配基，为抗病毒治疗以及基础研究提供有价值的实验依据。