【摘 要】
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背景:酒精性肝病（Alcoholic liver disease,ALD）是酒精相关疾病死亡的主要病因[1],占美国所有因肝硬化死亡患者的48%[2]。ALD有进一步可发展成肝癌的风险[1,3],并且其预防和治疗选择有限[4,5]。因此,识别新的生物标记物、治疗靶点和新的治疗药物来预防、管理或逆转疾病的进展是至关重要的。葛根素（Puerarin,Pue）可通过调节氧化应激、炎症反应等在肝脏中发挥重
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背景:酒精性肝病（Alcoholic liver disease,ALD）是酒精相关疾病死亡的主要病因[1],占美国所有因肝硬化死亡患者的48%[2]。ALD有进一步可发展成肝癌的风险[1,3],并且其预防和治疗选择有限[4,5]。因此,识别新的生物标记物、治疗靶点和新的治疗药物来预防、管理或逆转疾病的进展是至关重要的。葛根素（Puerarin,Pue）可通过调节氧化应激、炎症反应等在肝脏中发挥重要作用,但对ALD保护及治疗相关的分子机制和作用靶点尚不清楚,限制了葛根临床应用的进一步发展。目的:探讨葛根素对酒精性脂肪肝小鼠模型肝脏的脂肪代谢影响,探索葛根素对肝脏发挥保护作用的可能机制,为葛根素临床应用提供理论基础。方法:将C57BL/6随机分为三组:正常对照组,模型实验组,葛根素（Pue）组,每组6只,共18只;三组小鼠均给予酒精对照饲料饲养5天后,对照组继续对照饮食,实验组和葛根素组给予酒精饲料喂养,葛根素组同时按每日80mg/kg灌胃;第16天造模结束后,取肝脏进行冰冻切片,行H＆E染色、油红O染色,观察肝脏在镜下形态结构的改变。同时采用聚合酶链式反应（Polmerase chaill reaction,PCR）技术,检测各组小鼠肝脏中脂肪代谢相关基因SCD1、ACOX、CPT1A、CD36、S LC27A2、SLC27A5mRNA表达情况变化;检测各组小鼠肝脏中NLRP6、NF-κB通路中mRNA的表达。结果:1.病理切片显示,实验组小鼠肝脏与对照组相比,有大量脂肪变性肝细胞在中央静脉周围呈斑点状分布,伴炎性浸润,细胞间隙增大,肝索紊乱;而Pue组的小鼠肝索结构较实验组清晰,肝细胞脂肪变性减少。Image-pro Plus6.0软件定量Pu e组与实验组油红O染色后的脂滴含量,显示两组之间有统计学意义（P＜0.05）。2.PCR检测的结果显示,实验组与对照组中肝脏SCD1 mRNA表达,Acox、CPT1A mRNA表达无显著差异（P＞0.05）;Pue组与实验组比较,Scd1mRNA表达显著下调（P＜0.01）,Acox、CPT1A mRNA表达显著上调（P＜0.05）。3.PCR检测结果显示:与对照组相比,实验组小鼠肝脏中Slc27A2、Slc27A5的mRNA表达显著上调（P＜0.01）,而CD36的表达两组无显著差异;用药后,与实验组比较,Slc27A2、Slc27A5的mRNA表达显著下调（P＜0.05）,CD36的表达两组无差异。4.PCR检测各组小鼠肝脏中NF-κB信号通路相关基因的表达显示,与对照组小鼠相比,实验组中的rela、nfκb1 mRNA表达显著上调（P＜0.05）;Pue组与实验组比较,Pue组中rela、nfκb1 mRNA表达减少（P＜0.05）。5.PCR结果显示,与对照组相比,NLRP6在实验组肝脏中的表达水平显著下调（P＜0.05）;与实验组相比,Pue组中NLRP6 mRNA表达显著上调（P＜0.01）。结论:葛根素可以通过减少肝脏脂肪酸从头合成和脂肪酸的转运,增加β氧化,改善酒精性脂肪肝小鼠肝脏结构,预防肝细胞脂质沉积;葛根素可能通过上调肝脏NLRP6从而抑制NF-κB信号通路的激活,发挥其保护作用,但仍需在细胞及分子水平上进一步验证。
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