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目的:本研究通过建立贵州小型猪顺铂肾损伤模型,观察护肾Ⅰ号对其预防作用,并探讨其可能的作用机制。
方法:将贵州小型猪随机分为正常对照组、顺铂模型组、中药对照组、中药预防组。于注射顺铂前5天开始,按2ml/kg每天给中药预防组灌服护肾Ⅰ号煎剂,连续灌胃5天。在实验第5天以4mg/kg顺铂一次性腹腔注射制作贵州小型猪肾损伤模型。通过膀胱插管收集尿液,动态观察给顺铂前后第0、1、3、6、24、48、96 h 时段贵州小型猪的尿量,测尿液尿素氮、肌酐、β2-微球蛋白浓度;并于每个上述时段尿液收集完毕时,前腔静脉取血,测定相应时段的血清尿素氮、肌酐、β2-微球蛋白浓度、超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量;根据各时段尿量、尿液肌酐与血清肌酐浓度,计算内生肌酐清除率。实验第8天,进行酚红排泌试验,测定注射酚红后第1、2h尿液中酚红含量。实验第9天,在麻醉状态下心脏抽血处死贵州小型猪,取材,测肾脏系数,取肾脏于10%福尔马林溶液固定,石蜡包埋,HE染色,光镜观察肾组织形态学变化。
结果:
1.与正常对照组比较,顺铂模型组贵州小型猪尿量、尿中酚红含量、尿素氮和肌酐排出量显著或极显著减少(P <0.05,P <0.01),血清尿素氮、肌酐、β2-微球蛋白浓度、丙二醛含量及尿β2-微球蛋白浓度显著或极显著升高(P <0.05,P <0.01),血清超氧化物歧化酶活力和内生肌酐清除率显著或极显著降低(P <0.05,P <0.01)。肾脏病理组织学检查结果显示,顺铂模型组肾小球结构清楚,但可见明显充血,肾近曲小管上皮细胞重度浊肿,管腔内可见明显蛋白管型。
2.中药预防组给予护肾Ⅰ号预处理后,能明显改善顺铂所致贵州小型猪肾损伤的肾功能,增加尿量、尿中酚红含量、尿素氮和肌酐排出量,降低顺铂所致贵州小型猪血清尿素氮、肌酐、β2-微球蛋白浓度、丙二醛含量及尿β2-微球蛋白浓度的升高,提高血清超氧化物歧化酶活力和内生肌酐清除率。肾脏病理组织学检查可明显改善顺铂引起的肾小球充血、肾近曲小管浊肿及管型的病理改变。
结论:
1.顺铂能导致贵州小型猪肾功能和肾组织结构损伤。
2.护肾Ⅰ号能明显减轻顺铂对贵州小型猪肾功能和肾组织结构的损害,提示预防性给予护肾Ⅰ号对顺铂肾损伤贵州小型猪具有一定的预防作用。
3.护肾Ⅰ号能明显提高贵州小型猪的抗氧化能力,有助于减轻顺铂对肾脏的过氧化损害,此作用可能是护肾Ⅰ号对顺铂肾损伤预防作用的主要机制之一。