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OPN和TIP30在口腔鳞癌中的表达及其上调对cal-27细胞的影响研究目的:观察口腔鳞状细胞癌中OPN和TIP30的表达情况,研究上调OPN或TIP30后对舌鳞癌细胞cal-27细胞株生物行为的影响。研究方法:通过蛋白印迹(western blot)法检测口腔鳞状细胞癌组织(n=14),癌旁组织(n=14)和正常口腔黏膜(n=8)中OPN和TIP30的蛋白表达情况。分别通过感染或转染技术上调cal-27细胞株的OPN和TIP30。分别运用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法和蛋白印迹法检测感染或转染细胞株中OPN和TIP30的表达情况。通过CCK-8实验检测上调后cal-27细胞株的增殖能力,通过细胞划痕实验检测上调后cal-27细胞株的迁移能力。采用SPSS20.0软件分析上述结果。实验结果:1、OPN在口腔鳞癌,癌旁组织和口腔正常组织中的蛋白表达情况的比较采用单因素方差分析和多个样品均数的多重比较法分析。OPN蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达高于癌旁组织和正常口腔黏膜组织(P<0.001)。尚不能认为癌旁组织和正常口腔黏膜组织中OPN蛋白表达有差异(P=0.592)。2、TIP30在口腔鳞癌,癌旁组织和口腔正常组织中的蛋白表达情况的比较采用单因素方差分析和多个样品均数的多重比较法分析。TIP30蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达低于癌旁组织和正常口腔黏膜组织(P<0.001)。尚不能认为癌旁组织和正常口腔黏膜组织中TIP30蛋白表达有差异(P=0.540)。3、上调cal-27细胞株的OPN mRNA和蛋白表达检测采用配对T检验分析。感染shOPN病毒的cal-27细胞比对照组(shN)中OPN的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.001,P=0.002)。4、上调cal-27细胞株的TIP30 mRNA和蛋白表达检测采用配对T检验分析。转染pTIP30质粒的cal-27细胞比对照组(pc3.0)中TIP30的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P=0.001,P=0.003)。5、OPN上调后cal-27细胞株的增殖能力检测采用多重重复测量资料的方差分析。cal-27-shOPN细胞的增殖能力强于cal-27-shN细胞(P<0.001)。6、TIP30上调后cal-27细胞株的增殖能力检测采用多重重复测量资料的方差分析。cal-27-pTIP30细胞的增殖能力低于cal-27-pc3.0细胞(P<0.001)。7、OPN上调后cal-27细胞株的迁移能力检测采用多重重复测量资料的方差分析。24h时,cal-27-shOPN细胞的迁移能力强于cal-27-shN细胞(P=0.002)。8、TIP30上调后cal-27细胞株的迁移能力检测采用多重重复测量资料的方差分析。24h时,cal-27-pTIP30细胞的迁移能力低于cal-27-pc3.0细胞(P=0.005)。结论:口腔鳞状细胞癌中,OPN的表达升高,TIP30的表达降低。上调cal-27细胞株的OPN表达,能提高细胞的增殖和迁移能力;上调cal-27细胞株的TIP30表达,能降低细胞的增殖和迁移能力。OPN在口腔鳞状细胞癌的发生、发展中有促进作用,而TIP30作用可能相反。