目的：原代培养大鼠海马神经细胞,以高浓度皮质酮损伤细胞制作海马病理细胞模型,并观察左归丸和右归丸含药血清对皮质酮损伤海马神经细胞的作用。 方法：以出生24h的新生SD乳鼠脑分区海马组织为材料,进行原代培养海马神经细胞。于10％胎牛血清培养液、37℃,5％CO2培养箱中培养8-12天后,采用NSE特异的免疫细胞化学技术对神经细胞作特异性鉴定；将培养细胞分设以下6组：(1)正常对照组；(2)10-4mol/L皮质酮(CORT)损伤模型组；(3)10-4mol/LCORT+10％正常鼠血清组；(4)10-4mol/L CORT+10％左归丸含药血清组；(5)10-4mol/L CORT+10％右归丸含药血清组；(6)10-4mol/L CORT +0.5％拮抗剂(RU38486)组；用倒置相差显微镜或荧光显微镜观察各组培养细胞的形态结构变化；采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各组海马神经细胞的活性；采用羰基试剂法检测各组细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性；采用RT-PCR法检测各组海马神经细胞皮质酮受体(GR)mRNA的表达变化。 结果：显微镜下观察到原代培养的海马神经细胞生长良好,经NSE免疫细胞化学技术鉴定为海马神经细胞；培养细胞经CORT(10-4 mol/L)处理后,与正常对照组相比,倒置显微镜观察到CORT模型组有大量细胞死亡,存活的细胞树突和轴突变细、甚至消失；MTT法检测到细胞活性明显下降；培养液中LDH活性增高；SYT013/PI荧光染色法发现呈绿色荧光的活细胞明显减少,呈红色荧光的死亡细胞明显增多；当加入拮抗剂RU38486时,可以降低皮质酮对海马神经细胞的损伤作用。表明加入10-4mol/L的CORT对培养的海马神经细胞产生了明显的损伤作用,可以作为皮质酮损伤的海马病理细胞模型。与CORT处理的模型组比较,左归丸含药血清组或右归丸含药血清组,细胞形态结构明显改善,逐渐趋向正常对照组；MTT法测定细胞活性,发现左归丸含药血清或右归丸含药血清组细胞活性明显增加,上清液LDH漏出量也显著降低；SYT013/PI荧光染色法发现呈绿色荧光的活细胞明显增多,而呈红色荧光的死亡细胞明显减少。RT-PCR显示左归丸或右归丸含药血清组GR受体mRNA表达量上调。 结论：原代培养的海马神经细胞中加入10-4mol/L皮质酮处理,可以制作皮质酮损伤的海马病理细胞模型；加入左归丸或右归丸含药血清,连续四天培养期间,对损伤细胞的上述各项指标异常变化有不同程度的改善作用。