2型糖尿病大鼠建模、基因表达谱与细胞凋亡研究

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糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一种代谢失调性内分泌疾病,分为1型和2型.1型糖尿病又称为胰岛素依赖性糖尿病(i nsulin-dependent diabetes mellitus,IDDM),是由于胰岛β细胞功能缺陷和胰岛素分泌不足所引发;2型糖尿病又称为非胰岛素依赖性糖尿病(non-insulin-dependent diabetes mellitus,NIDDM),是由于胰岛素拮抗所引起的疾病.其中2型糖尿病的发病率很高,占85%~95%以上,该论文将利用基因芯片技术主要对Ⅱ型糖尿病进行研究.国外用于2型糖尿病研究的动物模型多为遗传型,虽然这类模型是2型糖尿病研究的良好模型,但是由于其价格昂贵,饲养和繁殖条件相对严格,因此国内不易获得.所以该文根据大量糖摄入和脂肪摄入会导致肌肉和脂肪组织胰岛素抵抗及会引起内源性糖产生抑制受损的原理选用6周Wistar大鼠先喂以高脂高糖饲料10周诱导胰岛素抵抗,然后给予小剂量STZ(25mg/kg)腹腔注射,继续高脂高糖饲料喂养最后诱导成2型糖尿病大鼠模型.模型建立后用生化检测仪、放射免疫法等对模型大鼠血清进行了一系列有关2型糖尿病的生化测定以进一步确定所建模型是否符合2型糖尿病的临床特征.同时对其右肾组织进行了冷冻切片,并用TUNEL试剂盒对其进行了细胞凋亡检测用以确定2型糖尿病肾组织损伤是否与肾组织细胞凋亡有关;同时用一步法提取左肾组织的总RNA,并将其反转录为cDNA,将其用于基因芯片杂交以检测2型糖尿病大鼠模型与正常大鼠之间基因表达谱的变化,并通过对差异表达基因的研究在基因水平上来探讨与2型糖尿病发病相关的基因,以进一步阐述2型糖尿病的发病机制.
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