目的:探讨⁹⁹Tc^m-3PRGD₂ SPECT显像在荷Lewis肺腺癌小鼠血管内皮抑素治疗效果评估中的价值。方法:1细胞培养及动物造模通过静置贴壁法培养Lewis肺腺癌细胞,收集对数生长期细胞配置成1.0×107/ml的单细胞悬液,注射于C57BL/6J小鼠右侧前肢皮下（0.2ml/只）,待肿瘤生长至直径1.0cm左右,取无明显差异（皮肤无溃烂、大小相近）的72只荷瘤小鼠用于实验。2实验分组及干预按随机数字表法将造模成功的72荷瘤小鼠随机分为2大组,每组36只:治疗组（treatment组）,对照组（control组）。再将每大组随机分为2个亚组,每组18只:治疗⁹⁹Tc^m-3PRGD₂显像组（治疗RGD显像组,TRGD组）,治疗99Tcm-MIBI显像组（治疗MIBI显像组,TMIBI组）,对照⁹⁹Tc^m-3PRGD₂显像组（对照RGD显像组,CRGD组）,对照99Tcm-MIBI显像组（对照MIBI显像组,CMIBI组）。TRGD组和CRGD组合计RGD显像组,TMIBI组和CMIBI组合计为MIBI显像组。治疗组每天按小鼠体质量腹腔注射人血管内皮抑素（恩度?）8μg/g（0.008ml/g）,对照组每天注射等体积0.9%生理盐水,治疗期间每天测量小鼠体质量。3体内显像及图像分析治疗第3、7、14天各组分别取6只小鼠尾静脉注射⁹⁹Tc^m-3PRGD₂或99Tcm-MIBI 7.4MBq后1h（RGD）或2h（MIBI）行SPECT显像。观察显像剂分布,应用感兴趣区技术（region of interest,ROI）,勾画面积约25mm2感兴趣区,测定肿瘤部位平均放射性计数与肢体对侧相应部位同等大小ROI平均放射性计数的比值,即T/NT比值（target to nontarget ratio,T/NT）,重复测量5次取平均值。4免疫组化及结果判读每次显像结束后对小鼠进行心脏灌注并取出肿瘤组织,用游标卡尺测量肿瘤长短径,计算肿瘤体积。将肿瘤组织制成蜡块,切片,分别进行HE染色及整合素受体αⅤβ₃、增殖细胞核抗原Ki67免疫组化。αⅤβ₃阳性表达的结果判断以肿瘤细胞及新生血管内皮细胞胞膜及胞浆被染为棕黄色为标准,并计数阳性细胞所占比例;Ki67阳性表达的结果判断以细胞胞核染成棕黄色为标准,计数阳性细胞所占比例即增殖指数。5统计分析采用SPSS21.0进行数据分析,计量资料的数据描述采用`x±s或M（QR）,组间数据用t（t’）检验或wilcoxon秩和检验进行比较,组内数据用单因素的方差分析,两两间比较用SNK检验;T/NT比值与αⅤβ₃、Ki67的表达相关性采用Spearman秩相关分析;以P<0.05认为有统计学差异。结果:1荷Lewis肺腺癌小鼠模型的成瘤率100%。2重组人血管内皮抑素治疗期间小鼠体质量均增加,治疗组与对照组比较差异无统计学意义（t=-0.868,P=0.389）。3重组人血管内皮抑素治疗期间荷Lewis肺腺癌肿瘤体积均增大,治疗组较对照组增长缓慢,差异有统计学意义（Z=-1.995,P=0.046）。4荷瘤小鼠⁹⁹Tc^m-3PRGD₂及99Tcm-MIBI体内显像CRGD组治疗第3、7、14天肿瘤部位均可见明显的放射性浓聚,TRGD组治疗第3天、7天肿瘤部位放射性浓聚程度较对侧组织强,治疗第14天肿瘤部位呈现放射性稀疏。余胸部可见均匀的放射性摄取,肾和膀胱出现放射性浓聚。TMIBI组及CMIBI组治疗第3、7、14天肿瘤部位均呈现放射性缺损,随着肿瘤增长,放射性缺损面积增大,挤压周围脏器,纵隔出现明显左偏。余胸部可见均匀摄取显像剂,心肌未见明显摄取显像剂,腹部胃肠道呈现放射性浓聚。5 ⁹⁹Tc^m-3PRGD₂及99Tcm-MIBI体内显像T/NT比值TRGD组治疗第3、7、14天T/NT比值分别为2.25±0.15、1.75±0.09、0.85±0.25;CRGD组治疗第3、7、14天T/NT比值分别为2.32±0.12、3.17±0.14、3.30±0.05;TRGD组与CRGD组比较,第3天T/NT比值差异无统计学意义（t=-0.943,P=0.368）;第7、14天T/NT比值差异均有统计学意义（t/t’=-20.705,-43.797;P=0.000,0.000）。TRGD组内第3、7、14天T/NT比值两两比较均有统计学差异（P3-7=0.000,P7-14=0.000,P3-14=0.000）,CRGD组内第3天与第7、14天比较有统计学差异（P=0.000,0.000）,7天与14天比较无差异（P=0.096）。TMIBI组治疗第3、7、14天T/NT比值分别为1.01±0.04、0.82±0.06、0.52±0.08;CMIBI组治疗第3、7、14天T/NT比值分别为1.00±0.04、0.84±0.08、0.53±0.09;TMIBI组和CMIBI组比较,治疗第3、7、14天差异均无统计学意义（t=-0.520、-0.467、-0.237,P=0.616,P=0.651,P=0.817）。TMIBI组内比较,治疗第3、7、14天T/NT比值两两比较均有统计学差异（P3-7=0.000,P7-14=0.000,P3-14=0.000）,CMIBI组内比较,治疗第3、7、14天T/NT比值两两比较有统计学差异（P3-7=0.020,P7-14=0.000,P3-14=0.000）。6肿瘤组织HE染色及整合素受体αvβ₃和增殖细胞核抗原Ki67表达情况HE染色:对照组境界清楚,肿瘤细胞密度较高,形态完整,有明显的核异型和活跃的核分裂相;与对照组相比,治疗组肿瘤细胞密度减小,组织呈片状坏死,镜下见片状或多灶性细胞凋亡,伴炎性细胞浸润。治疗组、对照组均有不同程度αⅤβ₃和Ki67表达。αⅤβ₃染色可见肿瘤细胞的细胞膜及胞浆染成棕黄色,而细胞核未被一抗染上而呈现蓝色。Ki67染色可见肿瘤细胞细胞核呈现棕黄色,而胞浆为蓝色。随着治疗天数增加,治疗组阳性细胞比例逐渐减少,而对照组阳性细胞比例增多。7整合素受体αvβ₃及增殖细胞核抗原Ki67的表达阳性比例治疗组第3、7、14天αvβ₃阳性细胞比例分别为:0.540±0.025、0.410±0.040、0.330（0.305-0.375）;对照组第3、7、14天αⅤβ₃阳性细胞比例分别为0.600（0.580-0.630）、0.680（0.623-0.700）、0.730（0.700-0.770）,治疗组与对照组αvβ₃阳性细胞比例比较有统计学差异（Z=-6.189,P=0.000）。治疗组第3、7、14天Ki67增殖指数分别为:0.680±0.050、0.420（0.385-0.445）、0.360（0.310-0.378）;对照组第3、7、14天Ki67增殖指数分别为:0.740±0.040、0.735（0.675-0.780）、0.710（0.660-0.720）。治疗组较对照组Ki67表达下降,差异有统计学意义（Z=-5.449,P=0.000）。8 ⁹⁹Tc^m-3PRGD₂及99Tcm-MIBI SPECT显像T/NT比值与整合素受体αⅤβ₃和增殖细胞核抗原Ki67表达相关性RGD显像组T/NT比值与αⅤβ₃和Ki67表达均成正相关（r=0.934,P=0.000;r=0.721,P=0.000）;MIBI显像组T/NT比值与αⅤβ₃和Ki67表达均无明显相关性（r=0.048,P=0.783;r=0.307,P=0.068）。结论:1 ⁹⁹Tc^m-3PRGD₂在Lewis肺癌小鼠体内显像较非特异性肿瘤显像剂99Tcm-MIBI具有较高的靶/非靶比值,能用于实体瘤抗血管生成治疗的疗效评估。2 99Tcm-MIBI在Lewis肺癌小鼠体内显像呈放射性缺损,在部分胸部肿瘤诊断及疗效评估中具有局限性,可用⁹⁹Tc^m-3PRGD₂ SPECT显像进行补充。