近年来中药安全性事件频发,成为中药现代化发展的一个重要阻力,并对中药新药创制和二次开发过程中的临床前评价提出了新的挑战。参附方由人参、附子两味药组成,临床用于治疗心力衰竭,疗效确切,但出现休克、过敏反应等不良反应。课题分析煎煮时间、药对配伍对指标性成分质和量的影响,旨在发现参附中的毒性成分和效应成分,为组分中药优化设计提供科学数据,阐明参附配伍的科学内涵,建立配伍减毒作用的物质基础分析研究模式。本文首先运用均匀设计和固定附子剂量与人参不同配比两种方法考察人参附子不同比例配伍对小鼠急性毒性的影响,发现参附配伍减毒的剂量配比。进而在药对配伍层面上,从多个方面分析药对配伍对附子生物碱和人参皂苷含量的影响。最后,考察参附注射液的血清化学,发现吸收入血的化学成分,从体内体外两个水平发现参附配伍减毒作用的物质基础。小鼠均匀设计急性毒性实验的研究结果表明,随着附子给药剂量的增大,小鼠的死亡率呈上升趋势,且随着人参对附子的比例增大减毒作用呈现增强趋势。固定附子LD50与人参不同配比的减毒作用研究结果表明人参与附子配伍的减毒作用在一定范围内随着人参剂量的增加而增加,尤其在人参：附子为1：1及大于1：1时更明显。人参附子配比1：1为参附配伍减毒作用的分界点,可作为临床用药的参考依据。附子中的生物碱成分随煎煮时间的变化结果表明,乌头碱、中乌头碱、次乌头碱等毒性较大的双酯型二萜类生物碱在2-10min其含量较高,而苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰中乌头原碱等毒性较小的单酯型二萜类生物碱的含量在60min内是趋于增加的,随后其含量趋于稳定。以双酯型二萜类生物碱为主要药效的附子制备时间最好30min内,以单酯型二萜类生物碱为主要药效的附子制备时间最好60min内。人参附子配伍的正离子模式时人参附子药对合煎液中次乌头碱、去氧乌头碱的含量明显降低,而14-苯甲酰中乌头原碱、14-苯甲酰次乌头原碱、去乙酸中乌头原碱等含量升高。人参附子药对配伍应用时双酯型二萜生物碱的含量明显降低,而单酯型二萜生物碱的含量明显升高,这可能是人参附子药对配伍减毒作用的物质基础。同时用半夏与附子配伍作为生物碱减毒增效作用的佐证结果表明,两药合煎液中次乌头碱、中乌头碱、乌头碱、去氧乌头碱、10-OH-中乌头碱、10-OH-乌头碱等含量明显增高,而中乌头原碱、去乙酸中乌头原碱、去乙酸次乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、10-OH-苯甲酰中乌头原碱等含量降低。附子半夏药对配伍应用时双酯型二萜生物碱的含量明显增高,而单酯型二萜生物碱的含量明显降低,从另一方面验证了参附配伍减毒的作用。人参附子配伍的负离子模式时,人参附子药对合煎液中的竹节人参皂苷Ⅳa含量增加显著,(20R)-人参皂苷Rh1和人参皂苷Ma-Rd的含量增加,合并液中麦芽糖的含量明显增加,合煎液中的人参类成分的含量增加很可能是人参附子药对配伍增效作用的物质基础。麦冬与人参配伍作为佐证的结果表明,人参麦冬药对合煎液中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、丙二酸甲酰基人参皂苷Rb1的含量减少,而人参皂苷Rb3、丙二酸甲酰基人参皂苷Rb2、丙二酸甲酰基人参皂苷Rc、人参皂苷Rf的含量增加。人参与麦冬配伍人参三醇型人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量降低,人参二醇型人参皂苷Rb3的含量升高,从另一方面验证了参附配伍增效的作用。最后,参附注射液的血清药物化学结果表明,人参皂苷Rd、Rg1、Ro的血药维持时间较短,人参皂苷Rb1、Rb2、Rc的血药维持时间较长。本文探讨了制备条件与制备方式对指标性成分质和量的影响。建立了附子人参配伍后毒性成分的指纹图谱及量毒关系,发现双酯型二萜生物碱是参附毒性的主要成分,将化学分析和毒性作用进行相关分析,发现了人参对附子减毒的物质基础。以后将针对双酯型二萜生物碱进行参附方减毒的深入考察,揭示配伍过程对毒性和药效影响的机理,进而揭示配伍后化学实质的科学内涵和变化规律。