养血补肾方对实验性高度近视巩膜细胞凋亡的保护作用

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目的 观察养血补肾方对形觉剥夺性近视眼巩膜细胞凋亡的影响。方法 取2周龄健康豚鼠,通过半透明眼罩单眼遮盖60 d制备形觉剥夺性近视模型,将造模成功豚鼠随机分为对照和给药2组,测量造模前后双眼屈光度和眼轴。给药组给予养血补肾方水煎液(生药量12.7 g/kg)灌胃,连续灌胃15 d,每天灌胃一次,对照组不进行干预。采用HE染色法观察巩膜组织形态学变化,分别通过终末脱氧核糖核苷酸转移酶介导原位缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞术观察巩膜细胞的凋亡情况,比较近视眼和对照眼的差异。同时应用透射电镜技术观察近视眼模型组和对照组中巩膜组织的超微结构。结果 半透明眼罩遮盖豚鼠单眼60d后成功制备实验眼剥夺性近视模型,与自身对照眼相比屈光度明显增加,剥夺前屈光度为3.52±0.79 D,剥夺后-2.88±1.61 D(P<0.05),差异有统计学意义。造模前右眼(形觉剥夺眼)眼轴平均长度为(7.32±0.18)mm,造模后它们右眼眼轴平均长度为(8.60±0.20)mm,眼轴长度明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,给药组灌胃15 d后,豚鼠巩膜组织形态明显改善,TUNEL凋亡率结果:对照组对照眼13.43±3.50,对照组模型眼85.71±12.75,治疗组模型眼凋亡率41.43±8.75。治疗后巩膜细胞的凋亡率呈明显降低(P<0.05)。差异有统计学意义。透射电镜观察表明对照组形觉剥夺眼巩膜胶原纤维分布稀疏,胶原直径明显减小,纤维间空隙增大。巩膜细胞凋亡数量增多。对照组及治疗组对照眼巩膜胶原纤维分布均匀,纤维直径无明显改变,细胞外基质少。未见典型凋亡细胞。治疗组形觉剥夺眼巩膜胶原纤维分布较致密,胶原纤维直径减小不明显,纤维间空隙轻度增大。可见个别凋亡细胞。结论 养血补肾方能够明显改善豚鼠形觉剥夺性近视眼巩膜组织的形态,显著降低巩膜细胞的凋亡,提示养血补肾方可能通过降低巩膜细胞凋亡来发挥对巩膜细胞保护作用。
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