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目的研究X染色体耦联锌指蛋白(zinc-finger protein x-linked,ZFX)在肝内胆管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,并探讨其对肝内胆管癌(Intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)预后的影响。体外细胞实验si RNA沉默人肝内胆管癌HCCC-9810细胞中ZFX基因的表达,观察对HCCC-9810细胞凋亡、迁移的影响,以期为肝内胆管癌的提供新的分子治疗。方法第一部分回顾性收集安徽医科大学第一附属医院院肝胆胰外科2012年2月至2017年2月行手术治疗且临床病历资料完整肝内胆管癌患者的组织蜡块,共选取60例肝内胆管癌肿瘤组织、50例邻近的癌旁正常胆管组织以及15例肝内胆管结石的胆管组织标本。以癌组织为实验组,癌旁组及结石组为对照组,通过免疫组织化学法(PV-9001二步法)检测各组ZFX的表达情况。探讨ZFX在癌组织中的表达(高表达组和低表达组)与临床病理特点之间的关系。应用Kaplan-Meier法绘制两组术后总体生存曲线,并用Cox回归分析模型确定ICC患者预后的独立影响因素。第二部分体外培养人肝内胆管癌HCCC-9810细胞,分别用含ZFX目的基因的si RNA(ZFX-si RNA)和无义序列的si RNA(NC-si RNA)转染细胞,将实验分ZFX-si RNA组、NC-si RNA组和空白对照Cell组三组,各组细胞培养72 h后,用Western blot检测细胞中ZFX基因蛋白水平的变化,最后用流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验检查细胞迁移能力。结果1.ZFX蛋白在肝内胆管癌组织、癌旁组织及肝内胆管结石组织中高表达率分别是73.3%、38%、26.7%,且肿瘤组织中的高表达率明显高于癌旁组织(χ2=13.914,P<0.001)和正常肝内胆管结石组织(χ2=11.343,P=0.001)。2.肝内胆管癌组织中ZFX在血清CEA升高、肿瘤分化程度低、有淋巴结转移、TNM分期高的患者高表达率较高,且与血清CEA、肿瘤分化程度的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。3.Kaplan-Meier法分析结果显示ZFX高表达患者总体生存率明显低于ZFX低表达患者(P=0.006)。多因素Cox回归模型分析结果表明ZFX表达是肝内胆管癌患者不良预后的独立影响因素(HR=2.635,95%CI=1.044~6.651,P=0.040)。4.体外实验ZFX-si RNA转染HCCC-9810细胞株72h后,Western blot检测结果表明与NC-si RNA组(对照组)和Cell(空白对照)相比,ZFX-si RNA有效降低了HCCC-9810细胞系的ZFX蛋白水平的表达。5.细胞凋亡实验表明,ZFX-si RNA组细胞的凋亡率高于Cell组(t=22.623,P<0.05)和NC-si RNA组(t=24.854,P<0.05)。6.细胞划痕实验表明,ZFX-si RNA组细胞迁移数量明显低于Cell组和NC-si RNA组(P<0.05),而对照组Cell和NC-si RNA组之间未见明显差异。结论1.ZFX在肝内胆管癌中表现为高表达,ZFX的表达与肝内胆管癌恶性临床病理特征相关,高表达的ZFX是肝内胆管癌不良预后的独立因子。2.沉默ZFX基因的表达促进肝内胆管癌HCCC-9810细胞的凋亡和抑制细胞迁移。