多棘海盘车化学成分的分离与鉴定研究

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:redghy
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多棘海盘车(Asterias amurensis Lutken)属于海盘车科(Asteriidae)海盘车属(Asterias),又叫做五角星、海星、星鱼,于我国渤海、黄海海域分布广泛。研究表明,海星的化学成分大多具有抗癌、降压、细胞毒性、溶血及抗炎等生物活性。本文主要对多棘海盘车做了以下的工作:1.化学成分研究:用70%乙醇对多棘海盘车进行提取后进一步分离纯化。一部分乙醇粗提物通过大孔吸附树脂分离,用五种不同浓度乙醇洗脱后,得到组分A1-A5;另一部分用石油醚脱脂后,依次用乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,各层浸膏依次记为B1-B4。利用多种色谱技术和重结晶等化学物理方法分别对乙酸乙酯和正丁醇浸膏分离提纯,共分离得到8种单体化合物,通过理化常数测定及NMR数据分析,得到了6种化合物的结构,它们分别为:Phalluside1(AAL-I),N-(胆甾-5-烯-3β-烃基)-3β-醋酸酯-5-乙基-17β-咪唑羧酰胺(AAL-II),胆甾-5,20(22)-二烯-3β-醇(AAL-V),肉豆蔻酸(AAL-VI),一水合立方癸烷(AAL-Ⅶ),(2S)-1-O-heptatriacontanoyl glycerol(AAL-Ⅷ)。其中AAL-I、AAL-II、AAL-V、AAL-Ⅷ为属首分。2.生物活性研究:测定九种粗组分对ACE酶的抑制作用,结果表明,各粗组分均对其具有剂量依赖性。90%乙醇洗脱物的IC50值(23.98mg·ml-1)和正丁醇层的IC50值(27.76mg·ml-1)分别为两组中最小的。结合各组分中甾体化合物含量测定结果可推断出皂苷含量可以影响ACE酶的活性。利用MTT法研究A2-A5对H292和H1299两种人肺癌细胞生长的影响。50%乙醇洗脱物对H1299的抑制率高达95.12%。利用MTT&SRB法研究了AAL-I(Phalluside1)和AAL-V(胆甾-5,20(22)-二烯-3β-醇)对6种癌细胞生长的影响。作用48h后, AAL-I对6种癌细胞均无明显抑制作用, AAL-V对6种癌细胞的抑制率随浓度的减小而降低。100μg·ml-1的AAL-V对SW620抑制作用最显著,其IC50值最小,仅为24.95±0.77μg·ml-1。采用流式细胞术检测不同浓度AAL-V分别处理HL60、SKBR-3和SW620细胞24h后的细胞状态,结果表明AAL-V可诱导三种癌细胞发生凋亡,且具有剂量依赖性。
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