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研究目的:常染色体显性多囊肾病（autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD）发病机制复杂,补体替代途径异常激活和炎症在ADPKD发病中的作用正受到重视。本研究旨在明确C3a-C3a R在ADPKD中的表达情况,探讨C3a-C3a R在ADPKD中的作用机制,并观察C3a R抑制剂SB290157对Pkd1条件敲除小鼠的治疗作用。方法:1.收集ADPKD肾切除患者的肾组织,并将肾癌患者癌旁5cm以上组织作为阴性对照;构建早期诱导Pkd1flox/flox-tamoxifen-cre小鼠模型,收集野生型与Pkd1敲除小鼠肾组织与血清。Elisa检测肾组织匀浆和血清C3a水平,免疫组化、Western blot和RT-PCR检测肾组织C3a R表达。2.将多囊肾小鼠分为（1）模型对照组;（2）治疗组:每日腹腔注射C3a R抑制剂SB290157（1mg/kg）;另设野生组;持续给药16天后处死。留取小鼠肾组织标本及血清,比较各组小鼠肾功能和囊肿相关指标;Elisa检测各组小鼠肾组织和血清C3a水平;HE染色观察对照组与治疗组小鼠囊肿生长情况;Ki67免疫组化染色比较各组小鼠肾组织增殖情况;TUNEL染色观察对照组与治疗组小鼠囊肿上皮细胞凋亡情况;Western blot检测各组小鼠肾组织C3a R及ADPKD相关信号通路蛋白的表达。3.Western blot、RT-PCR检测人肾小管上皮细胞系（RCTE细胞）和囊肿衬里上皮细胞系（WT9-12细胞）中C3a R表达,MTT检测不同浓度梯度及作用时间的SB290157在体外对WT9-12细胞增殖的抑制情况,流式细胞术观察SB290157对细胞周期的影响,Western blot检测SB290157在体外对ADPKD相关信号通路蛋白表达的调控。4.免疫荧光对小鼠多囊肾组织进行C3a R与F4/80共染,明确C3a R表达部位。免疫荧光比较模型对照组与治疗组小鼠肾组织巨噬细胞浸润情况。分别用脂多糖（LPS）和白介素4将小鼠骨髓源巨噬细胞（RAW264.7细胞）定向极化为M1型和M2型,对照组细胞为M0型,Western blot、RT-PCR、免疫荧光比较三型巨噬细胞C3a R表达。以LPS为刺激因素,C3a为干预因素,处理RAW264.7细胞,Elisa检测各组细胞培养上清中TNF-α水平,RT-PCR检测各组细胞i NOS、TNF-α、IL-6m RNA表达,Western blot检测各组细胞p-Akt、p-ERK、p-P65、p-STAT1、TNF-α蛋白的表达。结果:1.与对照组相比,C3a-C3a R表达在多囊肾患者和小鼠模型肾组织中均显著上调,且一定程度上与病情进展呈正相关。2.C3a R抑制剂SB290157显著改善多囊肾小鼠肾功能并使囊肿减轻,肾组织C3a-C3a R表达下调,囊肿上皮细胞增殖受限,凋亡增加,p-Akt、p-ERK、p-P65等ADPKD相关信号通路蛋白表达下调。3.与RCTE细胞相比,WT9-12细胞C3a R表达上调不显著,提示ADPKD中C3a R的主要差异表达部位并非囊肿衬里上皮细胞。SB290157在体外对WT9-12细胞增殖的抑制作用较弱,对p-ERK、p-P65等ADPKD相关信号通路蛋白的调控作用不显著。提示C3a-C3a R可能并不是通过直接作用于囊肿衬里上皮细胞促进ADPKD进展。4.多囊肾组织中C3a R与F4/80存在共定位,C3a R表达于巨噬细胞膜上。C3a R抑制剂能减轻小鼠多囊肾组织巨噬细胞浸润,提示C3a-C3a R可能对ADPKD肾脏巨噬细胞有趋化作用。C3a R主要表达于M1型巨噬细胞,C3a-C3a R激活M1型巨噬细胞内Akt、ERK、STAT1、NF-κB信号通路,促进TNF-α、IL-6炎症因子生成。结论:多囊肾组织中补体替代途径异常激活产生的C3a增多,引起巨噬细胞浸润和活化,促进M1型巨噬细胞分泌TNF-α进而促进ADPKD进展。C3a R抑制剂可减轻小鼠多囊肾组织炎细胞浸润,抑制囊肿生长,改善肾功能,可能是ADPKD一个新的治疗靶点。