目的 交通事故、工伤和手术引起的坐骨神经损伤越来越多,严重危害人类健康。周围神经系统需要大量的饱和脂肪酸才能使其髓鞘化,因此坐骨神经损伤后会释放大量游离的饱和脂肪酸。饱和脂肪酸可以通过TLR4/MD2信号通路触发小胶质细胞、星形胶质细胞等释放炎症因子,但其在坐骨神经损伤中的作用尚不清楚。探究饱和脂肪酸在受损的坐骨神经中是否激活雪旺细胞TLR4/MD2信号通路引发炎症反应,对坐骨神经损伤修复有重要的临床益处。方法 细胞实验:1.通过CCK8实验探索棕榈酸（PA）对雪旺细胞活力的影响;对照组和PA组炎性细胞因子Tnfa和Il-6的mRNA表达水平使用RT-q PCR检测;对照组和PA组炎性细胞因子TNFα和IL-6的蛋白分泌水平使用ELISA检测;Western Blot检测TLR4/MD2通路相关蛋白的表达变化。2.采用ELISA的方法检测抑制TLR4、MD2、NF-κB或MAPKs对PA诱导的雪旺细胞炎症因子分泌的影响;使用TLR4的抑制剂TAK242或MD2的抑制剂L6H21采用Western Blot的方法检测My D88、p-P65、P65、p-JNK、JNK、p-ERK、ERK、p-P38和P38蛋白的变化。动物实验:采用免疫荧光染色的方法检测雪旺细胞的频率;采用RT-q PCR的方法检测炎症因子Tnfa、Il-1b和Il-6 mRNA的表达变化;Western Blot检测炎症因子TNFα、IL-1β、IL-6蛋白水平的变化;HE染色检测炎症细胞浸润情况。结果 细胞实验:1.CCK8结果显示,与对照组相比,浓度为50和100μM的PA对雪旺细胞的影响不大,而150和200μM的PA对雪旺细胞具有一定的细胞毒性,因此,后续实验PA的浓度均使用100μM;RT-q PCR结果表明,PA刺激6小时后,雪旺细胞Tnfa和Il-6的mRNA表达增强;ELISA结果表明,PA刺激24小时后,雪旺细胞分泌TNFα和IL-6增多;Western Blot结果表明,PA激活了TLR4/MD2信号通路,TLR4、MD2、My D88、NF-κB和MAPKs蛋白表达增多。2.阻断TLR4或MD2可以抑制PA诱导的雪旺细胞TNFα和IL-6炎症因子的分泌;阻断NF-κB可以抑制PA诱导的雪旺细胞TNFα的分泌,但是对IL-6的分泌无影响;阻断MAPKs可以抑制PA诱导的雪旺细胞TNFα和IL-6炎症因子的分泌;Western Blot结果显示,阻断TLR4或MD2后可以抑制PA诱导的My D88、p-P65、p-JNK、p-ERK、p-P38蛋白的表达。动物实验:免疫荧光染色结果发现坐骨神经损伤24小时后雪旺细胞的频率增加,阻断MD2或TLR4雪旺细胞的频率减少;与injured组相比,L6H21组Tnfa、Il-1b和Il-6的mRNA表达水平显著减低,TAK242组Tnfa和Il-6的mRNA表达水平显著减低,而Il-1b的mRNA水平无变化;Western Blot结果显示,与injured组相比,坐骨神经损伤24小时后,L6H21组和TAK242组大鼠TNFα、IL-1β、IL-6蛋白表达显著降低;HE染色可见,exposed组大鼠坐骨神经纤维整齐清晰,没有发现炎症细胞,而injured组、L6H21组、TAK242组神经纤维杂乱,均发现炎症细胞,但L6H21组和TAK242组较injured组炎症细胞浸润明显减少。结论 1.饱和脂肪酸可以通过TLR4/MD2通路激活雪旺细胞炎症反应,为进一步探究坐骨神经损伤发生炎症反应的机制提供了依据。2.成功构建了大鼠的坐骨神经损伤模型,为动物实验的研究奠定了基础,揭示了TLR4和MD2参与坐骨神经损伤后炎症反应的发生。