黄粉虫抗氧化多糖的制备、纯化、分离及组成和活性研究

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黄粉虫是一种营养丰富且可食用的功能性昆虫,具有极大的开发潜力。随着生活质量的提升,黄粉虫被视为一种理想的功能性食材,应用添加到保健食品中日益进入大众视野。黄粉虫多糖作为一种重要的生物活性物质,具有较强的抗氧化功效,但其降血脂活性及黄粉虫多糖结构与生物活性之间的关系鲜见报道。因此,本研究从黄粉虫的水提液出发,探究黄粉虫抗氧化多糖的醇沉制备、纯化、分离及其组成和活性,旨在为黄粉虫多糖的应用提供一定的理论依据。主要结果如下:1.比较不同醇沉处理获得的多糖组成及抗氧化活性,80%醇沉获得的多糖体外抗氧化能力最强,命名为P80,具体表现为:P80为4 mg/m L时,DPPH自由基清除率为54.31%、?OH自由基清除率为39.58%、还原力为0.678。热风干燥、真空干燥和冷冻干燥三种干燥方式中,冷冻干燥较好的保留了黄粉虫多糖的抗氧化活性。除此之外,黄粉虫多糖具有体外结合胆酸盐的能力,可以起到降血糖作用,P80浓度为4 mg/m L时,胆酸盐结合率为26.99%。2.通过单因素和响应面试验确定黄粉虫多糖脱蛋白最佳工艺,结果表明:当振摇时间为17 min、静置时间为19 min、脱蛋白次数2次时,黄粉虫多糖的蛋白去除率为61.10%。除蛋白后,黄粉虫多糖P80?的总糖含量为62.24%,还原糖含量为7.19%、糖醛酸含量为0.78%、蛋白质含量为8.24%。且P80?的体外抗氧化活性增强。3.黄粉虫多糖P80?经DEAE-纤维素柱分离纯化得到TMP-1、TMP-2、TMP-3和TMP-4四个组分,回收率分别为15.79%、44.12%、9.94%、0.58%,其中各组分中总糖含量分别为60.28%、93.22%、6.03%、8.01%,糖醛酸0.41%、1.16%、0.06%、0.87%,TMP-1几乎不含蛋白质,TMP-2、TMP-3和TMP-4的蛋白质含量分别为2.35%、2.04%、2.77%。TMP-1、TMP-2、TMP-3和TMP-4四个组分的体外抗氧化活性相比,TMP-4活性最强,且差异显著。TMP-4的结构分析表明,TMP-4是一种糖苷键为α型的吡喃环中性多糖,最高峰分子量为9584,单糖组成主要是葡萄糖。以上结果确定了黄粉虫多糖醇沉的最佳乙醇浓度及多糖干燥方式,分析了黄粉虫多糖的生物活性,鉴定了黄粉虫多糖的理化性质和分子构成,明确了黄粉虫多糖TMP-4具有良好的抗氧化活性,为黄粉虫多糖相关功能开发和应用提供理论支持。
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