结直肠癌是人类消化系统最常见的恶性肿瘤之一,其发病率呈逐年上升趋势,预计到2020年,全球每年将有900万人遭受这种疾病,因此,对结直肠的研究愈来愈受到重视。一直以来,细胞增殖过多凋亡过少,被认为是肿瘤发生发展的重要原因,如何抑制肿瘤细胞的过度增殖,促进肿瘤细胞的凋亡是肿瘤研究的热点和焦点。HAX-1 [HS1(Haematopoietic cell specific protein1)-associated protein X-1],最早在人们研究造血细胞信号传导蛋白HS1 (Haematopoietic cell specific protein1)的过程中作为其伴侣分子被发现,它在各种组织中均有表达,并在亚细胞水平上优先定位于线粒体上。基于HAX-1同Nip3以及其同源的BCL-2的BH1、BH2序列的相似性；与caspase-9、PLN等许多细胞蛋白和病毒蛋白的相互作用；以及HAX-1在内质网钙离子循环中有重要的作用；暗示HAX-1在肿瘤细胞增殖、细胞凋亡起着重要的作用。但是该基因在结直肠肿瘤方面的研究,未见相关报道。我们应用RT-PCR、Western Blot技术和免疫组化技术检测了HAX-1基因在人结直肠正常组织和癌组织中的表达情况。构建包括全长HAX-1基因开放阅读框的真核表达载体及复制缺陷型腺病毒表达载体,将载体转入结肠癌细胞系SW480中,观察外源性HAX-1基因对该细胞系细胞增殖和细胞凋亡的影响；利用RNA干扰技术,沉默内源性的HAX-1在结肠癌细胞SW480中的表达,观察此时细胞增殖、凋亡影响,并初步探讨其机制。结果显示：(1)在结直肠组织中,肿瘤组织HAX-1的蛋白和mRNA表达水平明显高于癌旁正常组织。(2)成功构建了pEGFP-N1-HAX-1pFLAG-CMV4-HAX-1真核表达载体和复制缺陷型腺病毒载体Ad-HAX1-GFP。(3)过表达HAX-1的结肠细胞明显有拮抗凋亡的作用,且细胞增殖增加；RNA干扰沉默内源性HAX-1表达的结直肠肿瘤细胞拮抗凋亡的能力降低,并且细胞增殖减慢；(4)通过酵母双杂交技术和IP技术,证实SWH信号通路的核心元件hSav1与HAX-1直接相互作用,表明HAX-1参与了细胞增殖与凋亡的重要通路SWH信号通路；(5)HAX-1参与了结肠肿瘤SW480细胞中线粒体的caspase-9凋亡通路。(6)结肠癌细胞SW480中HAX-1表达的改变,引起cyclin A, cyclin B1、cyclin E的改变。由此,我们可以得出这样的结论：HAX-1基因与结直肠癌的发生发展密切相关；HAX-1基因参与了结直肠肿瘤细胞的增殖和凋亡活动；HAX-1很有可能是SWH信号通路和线粒体caspase-9凋亡通路的连接子。本实验旨在通过检测HAX-1在人结直肠肿瘤中的表达情况,揭示该基因与结直肠肿瘤的相关性；通过观察HAX-1对人结直肠肿瘤细胞的增殖、凋亡中的影响,进一步揭示该基因在结直肠肿瘤中的发生、发展中的作用,为结直肠肿瘤的治疗提供一定的理论基础。