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研究目的:
下齿槽神经来源于三叉神经下颌支,行走于下颌管并靠近下颌磨牙根尖部。多种因素容易损伤下齿槽神经,如肿瘤侵犯、拔除下颌阻生牙意外、下颌骨骨折等。神经损伤后目前仍没有很有效的治疗方法。下齿槽神经损伤后牙体牙髓的自身修复能力有何改变值得探讨。
本实验拟通过建立下齿槽神经损伤大鼠模型,研究下齿槽神经损伤对牙体机械性损伤刺激所引起的修复性牙本质形成的影响,进一步观察成牙本质细胞形态结构和牙髓牙本质复合体还原型辅酶II黄递酶(NADPH—d)的改变,阐明修复性牙本质形成过程中,神经因素及相关神经递质对成牙本质细胞的调控作用,为进一步探讨牙髓自身修复能力的神经调控作用获得实验依据。
材料和方法:
1.动物与分组:选用健康雄性Sprague-Dewley(sD)大鼠36只,随机分为二组,每组18只。分别为对照组(controlGroup,CG):修复性牙本质模型大鼠;实验组(ExperimentalGroup,EG):下齿槽神经损伤修复性牙本质模型大鼠。两组各再分为7天、14天、28天三个观察小组,每小组6只SD大鼠。对照组双侧下颌第一磨牙近中制备窝洞;实验组离断双侧下齿槽神经,双侧下颌第一磨牙近中制备窝洞。
2.固定取材:各小组大鼠普食喂养,分别在第7天、14天、28天处死,常规灌注固定,均截取含下颌第一磨牙段下颌骨,脱钙处理。
3.染色及光镜、透射电镜观察:冰冻切片,HE染色和NADPH-d组织化学染色,光镜下观察并拍片;常规透射电镜处理,透射电镜观察并拍片。
结果:
1.两组大鼠修复性牙本质形成的比较
1.1对照组修复性牙本质形成的过程
窝洞制备后第7天髓腔外侧修复性牙本质少量形成,第14天修复性牙本质形成较多,第28天修复性牙本质形成最多。
1.2实验组修复性牙本质的形成过程
与对照组类似,窝洞制备后第7天髓腔外侧修复性牙本质少量形成,第14天修复性牙本质的形成增加,第28天修复性牙本质形成最多。但在相同天数修复性牙本质与对照组比较,形成的量明显减少(P<0.05)。
2.两组大鼠牙髓牙本质复合体NADPH-d表达的比较
2.1对照组牙髓牙本质复合体NADPH-d的表达
窝洞下方成牙本质细胞层第7天NADPH-d表达呈阳性,第14天NADPH-d局部表达继续增强,呈强阳性,第28天NADPH-d呈阳性反应,较第14天时反应强度减弱。而第7天、14天、28天非窝洞下方的成牙本质细胞层NADPH-d呈弱阳性表达。
2.2实验组牙髓牙本质复合体NADPH-d的表达
窝洞下方成牙本质细胞层第7天NADPH-d呈弱阳性反应,第14天NADPH-d局部反应增强,呈阳性,第28天NADPH-d呈弱阳性反应。第7天、14天、28天非窝洞下方的成牙本质细胞NADPH-d呈弱阳性表达。相同天数窝洞下方成牙本质细胞层NADPH-d反应与对照组比较强度减弱(P<0.05)。
3.两组大鼠第28天成牙本质细胞及修复性牙本质超微结构的比较
3.1成牙本质细胞体超微结构的改变
对照组透射电镜下见成牙本质细胞体呈多边形或立方状,核大呈卵圆形,胞浆丰富。胞核位于细胞的基底部,胞体内有大量的线粒体和粗面内质网。实验组成牙本质细胞形态较细长,细胞核占的比例较大,胞浆较少,胞浆内各种细胞器较少。
3.2成牙本质细胞突起超微结构的改变
对照组透射电镜观察成牙本质细胞突起伸入牙本质小管,横径充满整个小管或2/3以上,突起内有细丝样结构。与对照组比较,实验组成牙本质细胞突起萎缩变细。
3.3牙髓牙本质界修复性牙本质胶原纤维的改变
透射电镜观察对照组修复性牙本质中的胶原纤维交织成网状,较粗,纤维较长,密度较大。实验组修复性牙本质中胶原纤维交织成网状,疏松,密度减低。
结论:
本实验通过建立下齿槽神经损伤大鼠模型,观察到下颌第一磨牙牙体机械性损伤后:
1.修复性牙本质形成量减少,胶原纤维交织成网状,密度减低。
2.成牙本质细胞形态改变:胞体细长,细胞核浆的比例较大,胞浆较少,胞浆内各种细胞器较少;成牙本质细胞突起萎缩变细。
3.牙髓牙本质复合体NADPH—d局部反应减弱。
提示下齿槽神经损伤可影响成牙本质细胞形成修复性牙本质,而一氧化氮可能参与对成牙本质细胞的调控以及牙髓损伤的自身修复过程。