基于SCF/c-kit调控ICC数量研究拨揉中焦穴位调节胃动力的机制

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ARCHERY6805068
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[目的]为评价拨揉中焦穴位调节胃动力的作用,研究拨揉中焦穴位调节胃动力的机制而开展本实验。本实验用胃内残留率来评价拨揉中焦穴位促进功能性消化不良(FD)大鼠胃动力恢复的效果,用免疫组化、Western blot检测相关蛋白的表达来探讨拨揉中焦穴位促胃动力恢复的机制是否与调节SCF/c-kit通路,影响Cajal间质细胞(ICC)的数量有关。[方法]将36只大鼠随机分为空白组、模型组、西药组、点穴组、阻断点穴组与模型阻断组,每组6只。除空白组外,其余5组均采用轻度夹尾刺激+不规则饮食造模法建立FD大鼠模型,造模共持续21天。阻断点穴组与模型阻断组于造模第12天起至干预结束,腹腔注射c-kit单克隆抗体(ACK2),0.2 mg/kg,隔日1次。造模成功后各组予以相应干预。点穴组与阻断点穴组选取阑门、建里穴施以左右拨揉,深度以触及腹主动脉明显搏动处,频率为25~35次/min,每穴6 min,共12 min,10mL/kg生理盐水灌胃,每日1次。西药组予以10mL/kg莫沙必利药液(按照大鼠与人临床的用药剂量、体型系数公式计算,并稀释成剂量为0.137 g/L悬浊液)灌胃,抓取12 min,每日1次。空白组、模型组、模型阻断组均抓取12min,10mL/kg生理盐水灌胃,每日1次。各组干预共持续14天。干预后检测各组大鼠胃内残留率,取胃窦组织,利用免疫组化检测ANO1的IOD值与阳性面积比,Western blot检测c-kit、SCF与PI3K蛋白表达。[结果]胃内残留率:模型组显著高于空白组(P<0.05),点穴组、西药组显著低于模型组(P<0.05),点穴组、西药组与空白组相比,差异无统计学意义(P>0.05);点穴组与西药组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。阻断点穴组、模型阻断组显著高于空白组(P<0.05),阻断点穴组、模型阻断组与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05);阻断点穴组、模型阻断组显著高于点穴组(P<0.05),阻断点穴组与模型阻断组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ANO1的IOD值与阳性面积比:各组IOD值与阳性面积比的变化趋势一致。模型组显著低于空白组(P<0.05),点穴组、西药组显著高于模型组(P<0.05),西药组、点穴组与空白组相比,差异无统计学意义(P>0.05);点穴组与西药组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。阻断点穴组、模型阻断组显著低于空白组(P<0.05),阻断点穴组、模型阻断组与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05);阻断点穴组、模型阻断组显著低于点穴组(P<0.05),阻断点穴组与模型阻断组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。c-kit表达:模型组显著低于空白组(P<0.05),点穴组、西药组显著高于模型组(P<0.05),点穴组、西药组与空白组相比,差异无统计学意义(P>0.05);点穴组与西药组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。阻断点穴组、模型阻断组显著低于空白组(P<0.05),阻断点穴组、模型阻断组与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05);阻断点穴组、模型阻断组显著低于点穴组(P<0.05),阻断点穴组与模型阻断组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。SCF表达:模型组显著低于空白组(P<0.05),点穴组、西药组显著高于模型组(P<0.05),点穴组、西药组与空白组相比,差异无统计学意义(P>0.05);点穴组与西药组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。阻断点穴组、模型阻断组显著低于空白组(P<0.05),阻断点穴组显著高于模型组(P<0.05),模型阻断组与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05);模型阻断组显著低于点穴组(P<0.05),阻断点穴组与点穴组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。阻断点穴组显著高于模型阻断组(P<0.05)。PI3K表达:模型组显著低于空白组(P<0.05),点穴组、西药组显著高于模型组(P<0.05),点穴组、西药组与空白组相比,差异无统计学意义(P>0.05);点穴组与西药组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。阻断点穴组、模型阻断组显著低于空白组(P<0.05),阻断点穴组、模型阻断组与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05);阻断点穴组、模型阻断组显著低于点穴组(P<0.05),阻断点穴组与模型阻断组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]拨揉中焦穴位可有效促进FD大鼠胃排空,促进胃动力恢复正常,且疗效与莫沙必利相当。拨揉中焦穴位可提高c-kit、SCF、PI3K表达,促进ICC数量基本恢复正常,效果与莫沙必利相当。拨揉中焦穴位促胃动力恢复的机制与上调SCF/c-kit通路,增加ICC数量有关。拨揉中焦穴位还可能通过其他途径增加ICC的数量,促进胃动力恢复。
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