几种芳香物质对柑橘采后主要致病菌的作用

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本文以柑橘采后主要致病菌作为研究对象,探究了柠檬烯、月桂烯和香茅醛对指状青霉、意大利青霉和酸腐病菌菌丝体生长以及孢子萌发的作用。其中,柠檬烯、月桂烯对病原菌菌丝体生长和孢子萌发主要为促进作用,香茅醛主要为抑制作用。主要结果如下:(1)对菌丝体而言,柠檬烯在低浓度下对指状青霉(0.2-0.8μL/m L)、意大利青霉(0.2-1.6μL/mL)和酸腐病菌(0.2-3.2μL/mL)表现出促进作用。月桂烯的促进作用的浓度范围分别为:指状青霉(0.2-6.4μL/mL)、意大利青霉(0.2-1.6μL/mL)和酸腐病菌(0.2-6.4μL/mL)。柠檬烯和月桂烯对三种菌的抑制作用不明显。香茅醛在低浓度下同样对三种菌表现出促进作用,对青霉而言,其浓度小于0.2μL/mL时,表现出促进作用,对酸腐而言,其浓度小于0.8μL/mL时,表现出促进作用。高浓度香茅醛显著抑制指状青霉、意大利青霉和酸腐病菌菌丝体生长,最小抑菌浓度MIC均为1.6μL/mL,最小杀菌浓度MFC分别为3.2、1.6、1.6μL/mL。(2)对孢子而言,柠檬烯在低浓度下对指状青霉(0.1-0.4μL/mL)、意大利青霉(0.4μL/mL)和酸腐病菌(0.4-1.6μL/mL)促进作用明显,超过这一浓度范围,表现为抑制作用。月桂烯促进作用更强,在所测试的浓度范围(0-3.2μL/mL)内一直表现出明显的促进作用。香茅醛在低浓度下对指状青霉(0.05μL/m L)、意大利青霉(0.1μL/mL)和酸腐病菌(0.05-0.2μL/mL)促进作用明显,超过这一浓度范围,表现为抑制作用。(3)低浓度柠檬烯对指状青霉孢子萌发的促进作用明显:通过转录组学和蛋白组学关联分析,找到19个柠檬烯诱导指状青霉孢子萌发的差异基因和蛋白。通过荧光定量PCR验证,验证差异表达的基因,其中有11个基因表达上调,8个基因表达下调,细胞膜上相关基因大量上调。通过代谢组学分析35种差异代谢物,关联48种代谢途径,与细胞膜上进行的ABC转运途径相关,这是指状青霉对柠檬烯信号的响应。综上,柠檬烯可能充当指状青霉孢子萌发的信号分子,其作用位点在细胞膜上。(4)月桂烯在较高浓度仍对指状青霉的孢子萌发表现出较强的促进作用:GC-MS分析和GC定量,发现月桂烯在指状青霉孢子萌发过程中不断减少,代谢组学研究发现月桂烯可以转化成丙酮酸,同时实验验证得到丙酮酸含量激增。丙酮酸进入柠檬酸循环,产生ATP,这与胞内ATP、ADP、AMP含量升高结果一致。综上,月桂烯可能充当指状青霉孢子萌发的营养物质,减少的月桂烯可以转化为丙酮酸,为孢子萌发提供能量。(5)高浓度香茅醛对指状青霉有很强抑制作用:香茅醛处理,导致指状青霉细胞形态发生明显破坏。通过荧光显微镜观察发现,荧光染料碘化丙啶(PI)能透过经过香茅醛处理的指状青霉的细胞膜,这一现象可以作为香茅醛诱导指状青霉发生膜损伤的直接证据。而胞外电导率和OD260nm值的上升,也证实了胞内物质发生了泄露,细胞膜通透性增加。通过活体实验,证实了香茅醛有作为柑橘采后保鲜剂的潜能。
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