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目的:注射疫苗可以引起猪过敏反应发生,尤其品种猪发病率较高,治疗不及时极易导致动物死亡。过敏反应主要由免疫球蛋白E(Immunoglobulin E,IgE)介导发生。临床上检测过敏反应的方法较多,其中特异性和敏感性较高、应用广泛的是检测血清IgE的含量,尤其是血清IgE的ELISA检测方法,在人过敏反应检测中的已有应用,因此分离纯化到猪体内的IgE是研究猪过敏反应ELISA检测方法的前提和基础。IgE在正常人血清中浓度极低,正常猪血清中IgE含量还未见有确定报道。本试验研究的目的是通过两种不同方法对感染绦虫实验猪血清、致敏实验猪血清以及正常猪血清三种不同样品中的IgE进行提取,以便据此来比较不同样品血清中IgE的提取方法的差异,并且通过SDS-PAGE电泳对血清中提取的IgE进行鉴定,从而建立猪血清IgE的最佳的提取方法,以便今后在分离纯化IgE以及抗IgE抗体等血清IgE的ELISA检测方法方面进行更为深入的试验研究。 方法:以感染绦虫实验猪血清和注射异源血清而致敏的实验猪血清为两个不同样品,将两个样品分别经过饱和硫酸铵盐析—Sephadex凝胶层析—DEAE离子交换层析和硫酸铵盐析—DEAE离子交换法—Sephadex凝胶层析两种不同的方法分离提取血清中IgE,并利用SDS—PAGE电泳分别检测和鉴定IgE提取物;同时,将正常猪血清样品也经过以上方法进行提取和鉴定,来进行比对。 结果:①.经两种方法提取感染绦虫实验猪和注射异源血清致敏实验猪血清中IgE,其中利用饱和硫酸铵盐析—DEAE离子交换层析—Sephadex凝胶层析方法中的IgE提取物经SDS一PAGE电泳后,在73KD处呈现一条带,即提取出猪的IgE;②.通过饱和硫酸铵盐析—SephadexG凝胶层析—DEAE离子交换方法进行分离提取上述两种血清样品,提取物经SDS一PAGE电泳后,未能提取出IgE;③.试验中,在正常猪血清样品中也未能提取到猪的IgE。