【摘 要】
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应用限制性内切酶图谱分析法,结合Southern印迹法和Dig核酸杂交技术,该文首次对茶毛虫核型多角体病毒(EpNPV)陕西株和恩施株基因进行了研究,并将其与苜蓿丫纹夜蛾多粒包埋核
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应用限制性内切酶图谱分析法,结合Southern印迹法和Dig核酸杂交技术,该文首次对茶毛虫核型多角体病毒(EpNPV)陕西株和恩施株基因进行了研究,并将其与苜蓿丫纹夜蛾多粒包埋核型多角体病毒(AcMNPV)、油桐尺蠖单粒包埋核型多角体病毒(BsSNPV)和中国棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒(HaSHPV)基因组进行了比较分析.结果表明不同种昆虫多角体病毒DNA的酶切图谱不相同;DNA酶切片段与不同种病毒的DNA标记探针之间无杂交带出现,而同种昆虫病毒的不同分离株之间,其DNA酶切图谱的一致性,随酶种类的不同而有所变化,但几乎所有的片段都可与同种的标记探针杂交.通过对病毒多角体切片的电镜观察,表明EpNPV的恩施株和陕西株都为双粒包埋;EpNPV基因组大小的估算值为130.96kb;以质粒pTZ19R为载体,构建了EpNPV基因组的部分质粒文库.同时,以AcMNPV的多角体基因所在酶切片段为模板制备的探针,首次将EpNPV的多角体基因成功地定位在:BamHⅠ-G、PstⅠ-F、EcoRⅠ-J、Hind Ⅲ-E、KpnⅠ-A、XbaⅠ-B片段上;在此基础上以pTZ19R为载体,对BamhⅠ-G片段进行了克隆和亚克隆.
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