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本论文以多穗柯为材料,采用小鼠巨噬细胞RAW264.7和小鼠肝癌细胞Hepa1c1c7两种细胞模型,以抗炎、抗癌活性为导向,以一氧化氮(NO)抑制率≥50%和醌还原酶(QR)诱导活性≥2为筛选指标,对提取的多穗柯挥发性组分、非挥发性组分进行功能评价,并对非挥发性组分中具抗炎、抗癌功能的分离单体通过质谱、核磁共振等技术进行了结构鉴定。此外,利用ELISA、western-blot等技术对多穗柯分离单体的抗炎、抗癌机制进行了探讨,获得结果主要如下:1、多穗柯挥发性组分提取、鉴定及其抗癌活性测定以多穗柯为材料,采用同时蒸馏萃取法(SDE)提取其香气组分,通过气质联用仪(GC-MS)对香气组分进行成分分析,并利用小鼠肝癌细胞Hepa1c1c7为细胞模型对香气组分和主要的单体物质进行抗癌活性测定。结果显示提取的多穗柯香气GC-MS鉴定出80种组分,占香精油总量的92.56%,其中香叶基丙酮、β-紫罗酮、桉油烯醇、壬醛等组分为多穗柯香气的主要成分。抗癌活性鉴定表明,多穗柯挥发性组分的浓度为27.50±0.10μg/mL时可诱导QR活性达到倍增,具有较强抗癌活性;其中香叶基丙酮和壬醛两个主要的挥发性单体成分诱导QR活性达到倍增的浓度分别为283.10±0.10μg/mL、297.77±0.12μg/mL。2、多穗柯非挥发性组分提取分离及其抗炎、抗癌活性研究(1)对多穗柯进行30%乙醇/乙酸乙酯提取获得粗提物,利用RAW264.7和Hepa1c1c7细胞模型分别测定粗提取物的抗炎、抗癌活性,结果表明粗提物具有较好的抗炎抗癌活性。将粗提物用硅胶柱层析分离得到F1~F4四个组分。活性分析表明F3同时具有较强抗炎、抗癌活性,其诱导QR活性达到倍增的浓度为12.19±0.08μg/mL,NO抑制率达到50%的浓度为18.36±1.20μg/mL。(2)F3经TLC分离出F3-1~F3-8八个组分,均具较好的抗炎、抗癌活性,其诱导QR活性达到倍增的浓度范围在1.59±0.09~28.3±0.02μg/mL,抑制NO达到50%的浓度范围在11.9±1.39~51.85±5.25μg/mL。液相色谱分析表明F3-5和F3-8两个组分物质组成较为单一。(3)对F3-5和F3-8经半制备色谱分离获得两个单体组分F3-5-1和F3-8-1。活性测定表明,F3-5-1抑制NO达到50%和诱导QR活性达到倍增的浓度分别为50.25±1.18μg/mL、22.50±0.39μg/mL,而F3-8-1抑制NO达到50%和诱导QR活性达到倍增的浓度分别为30.11±3.13μg/mL、47.08±0.21μg/mL。3、多穗柯抗炎、抗癌活性双功能单体组分的结构鉴定对从多穗柯中分离到的组分F3-5-1和F3-8-1分别进行高分辨率质谱及核磁共振分析,结果表明F3-5-1具有色原酮的基本母核结构,推测为秦皮乙素;F3-8-1为催吐萝芙木叶醇,是一种倍半萜类物质。4、多穗柯活性组分抗炎及抗癌作用机理的研究抗炎方面,利用LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7体外炎症模型,研究不同浓度的催吐萝芙木叶醇对RAW264.7细胞中炎症因子TNF-α和iNOS表达的影响。结果显示:采用不同浓度催吐萝芙木叶醇处理细胞24 h后,细胞中TNF-α和iNOS蛋白表达量随样品浓度升高而减少,并呈剂量依赖关系,说明催吐萝芙木叶醇在RAW264.7细胞中能通过抑制细胞炎症因子TNF-α和iNOS的蛋白表达发挥抗炎功能。抗癌方面,利用小鼠肝癌细胞Hepa1c1c7体外抗癌模型,研究不同浓度的催吐萝芙木叶醇对Hepa1c1c7细胞分泌NQO1蛋白的影响。结果显示:采用不同浓度催吐萝芙木叶醇处理细胞48h后,细胞中QR诱导活性提高的同时,细胞中NQO1蛋白表达量随样品浓度升高而增多,说明催吐萝芙木叶醇在Hepa1c1c7细胞中通过上调NQO1蛋白表达增加QR诱导活性发挥抗癌功能。