基于P2Y12受体的毛冬青总提取物抗血栓机制研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dsfaxfdsrfdx
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本课题首先研究三种动物血栓模型来初步揭示毛冬青总提取物的抗血栓作用,然后分别利用角叉菜胶模型,研究毛冬青总提取物对血管内皮的影响;并利用FeC13诱导血栓形成模型,研究毛冬青总提取物对P2Y12受体αGi亚单位和βγ亚单位功能的影响,以进一步探讨基于P2Y12受体的毛冬青总提取物的抗血栓作用机制,为寻找毛冬青抗血栓的作用靶点提供有力的科学依据,也为心血管疾病的防治及新药的研究开发提供新思路。方法:1.通过胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓、角叉菜胶诱导小鼠体内血栓以及FeC13诱导大鼠腹主动脉血栓模型,研究毛冬青总提取物的抗血栓作用。1.1胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成实验KM小鼠随机分成6组,即正常对照组、模型对照组、阿司匹林组、毛冬青总提取物高、中、低剂量组,每天灌胃给药一次,连续5 d。于第5 d末次给药45 min后,除正常对照组外,其余5组每鼠尾静脉注射胶原蛋白和肾上腺素的混悬液,正常对照组注射相同体积的生理盐水。观察并记录注射后5 min内小鼠死亡数和15 min内小鼠偏瘫的未恢复数,偏瘫以小鼠翻正反射消失为标准。1.2角叉菜胶诱导小鼠体内血栓形成实验KM小鼠随机分成6组,即正常对照组、模型对照组、阿司匹林组、毛冬青总提取物高、中、低剂量组,每天灌胃给药一次,连续8 d,在第5 d灌胃给药1h后,各组小鼠背部皮下注射3%角叉菜胶溶液诱发血栓,正常对照组于背部皮下注射生理盐水。观察注射角叉菜胶72 h后小鼠的黑尾发生率及黑尾长度。1.3 FeC13诱导大鼠腹主动脉血栓形成实验SD大鼠随机分成6组,即假手术组、模型对照组、肝素钠组、毛冬青总提取物高、中、低剂量组。除肝素钠组外,其余组每天灌胃给药1次,连续5 d。末次给药前12小时皮下注射肝素钠于肝素钠组,共给药2次,间隔时间为6小时。末次给药30 min后,所有大鼠用10%水合氯醛腹腔麻醉后剖腹,分离腹主动脉段,其下置保护薄膜,将完全浸透FeC13的滤纸片环抱于分离的腹主动脉段上。50 min后去除纸片,在滤纸环抱处大约截取1.0 cm长血管段,吸干血管中的残留血液后称重,然后取出血栓后的血管再称重,前后两者相减即为该1.0cm长血管段内血栓的重量。2.毛冬青总提取物对角叉菜胶诱导小鼠体内血栓实验中血管内皮功能的影响KM小鼠随机分成温控和阻断后反应性充血(Postocclusion Reactive Hyperaemia,PORH)两批,每批再随机分为6组,即正常对照组、模型对照组、硝苯地平组、毛冬青总提取物高、中、低剂量组。实验操作按照方法“1.2”进行,观察造模72 h后小鼠的黑尾发生率和相对黑尾长度,同时用PeriFluxsystem5000激光多普勒血流仪检测温控、反应性充血(PORH)所致的血流变化。3.毛冬青总提取物对FeC13大鼠体内血栓实验中P2Y12受体αGi亚单位和βγ亚单位功能的影响SD大鼠随机分为6组,即假手术组、模型对照组、氯吡格雷组、毛冬青总提取物高、中、低剂量组。实验操作按照方法“1.3”,分离颈总动脉进行实验,称量血栓湿重,HE染色观察血栓形态学改变;检测血小板聚集率、凝血四项(PT、APTT、TT、FIB)和ADP受体(P2Y12)的表达水平;其次检测P2Y12受体两个亚单位(αGi、βγ)的功能:αGi亚单位包括环腺苷酸(cAMP);γ亚单位包括血栓素(TXB2)、前列环素(6-Keto-PGF)、P-选择素;最后检测血小板胞浆Ca2+和血小板膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)的表达。结果:1.在胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成实验中,与模型组相比,毛冬青总提取物高、中、低(1、0.5、0.25 g/kg)各剂量组的小鼠的死亡和偏瘫数均降低,保护率提高;在角叉菜胶诱导小鼠体内血栓形成实验中,与模型组相比,毛冬青总提取物高、中、低(1、0.5、0.25 g/kg)各剂量组小鼠的相对黑尾长度均减少;在FeC13诱导大鼠腹主动脉血栓形成实验中,与假手术组相比,毛冬青总提取物高、中、低(0.78、0.39、0.195 g/kg)各剂量组形成血栓的湿重均减轻。2.在角叉菜胶诱导小鼠体内血栓形成实验中,毛冬青总提取物(125、62.5、31.25 mg/kg)各剂量组小鼠的相对黑尾长度均减少;造模前,各组随温度的变化,其血流百分变化值组间无差异性;造模后,与模型组比较,血流百分变化值加大;同样造模前,压力阻断前后,各组的血流变化值组间无差异性;造模后,与模型组比较,压力阻断前后,血流变化值降低;表明内皮损伤的程度减小,内皮的功能完善。3.在FeC13诱导大鼠体内血栓形成实验中,毛冬青总提取物(195、97.5、48.75 mg/kg)各剂量组均减轻形成血栓的重量和内皮受损程度;降低ADP诱导的血小板聚集率;降低FIB的含量及抑制P2Y12受体的表达,对APTT、TT、PT的表达几乎无影响;对αGi亚单位功能的影响是:提高cAMP的表达水平;对βγ亚单位功能的影响是:减少TXB2和P-选择素的含量、不影响6-Keto-PGF1α的表达;并降低血小板胞浆Ca2+平均荧光强度及抑制GPⅡb/Ⅲa的表达。结论:(1)毛冬青总提取物具有一定的抗动脉、静脉血栓的作用。(2)毛冬青总提取物能改善血管内皮的受损程度,具有保护血管内皮的作用。(3)毛冬青总提取物通过保护血管内皮,抑制血小板的聚集,最终抑制血栓的形成。(4)毛冬青总提取物通过影响P2Y12受体αGi亚单位和βγ亚单位功能的表达,降低P2Y12受体的含量,抑制血小板的聚集,最终抑制血栓的形成。
其他文献
耦合感应电能传输(Magnetic coupling induced wireless power transfer,MCI-WPT)技术利用线圈间耦合的电磁场实现能量的无接触传导。因其避免了线路老化,高压触电等线缆输电
近年来,随着电力电子技术和智能控制理论的发展,微电网作为一种新型的分布式发电技术,开始得到越来越多的关注和应用。微电网是指将额定功率位几十千瓦的发电单元----包括光
丹参为唇形科植物丹参SalviamiltiorrHiza Bge的干燥根和根茎,苦,微寒,归心、肝经,具有活血化瘀,痛经止痛,清心除烦,凉血消痈之功效。丹参是我国传统中药材,随着丹参市场的不
目的:建立吸水溶胀倍数、蛋白质含量、多糖含量、氨基酸比例、单糖组成以及唾液酸测定方法,探讨不同类型、不同产地的燕窝、速食燕窝及其常见伪品的差异,为建立燕窝质量标准
环保政策日益严格背景下,湿法脱硫技术在燃煤电厂得到迅速地推广和应用。湿法脱硫塔出口饱和烟气直接排放,部分水蒸气由于温度下降将与SO3等可凝结污染物发生凝结,形成呈白色或蓝色的“有色烟羽”,这些湿烟羽不仅污染视觉,还影响周边环境和气候,已引起广泛关注。燃煤电厂湿烟羽治理的主要工艺路线为烟气加热、降温冷凝和冷凝再热三类。本文进行燃煤电厂湿烟羽治理工艺研究,研究分为湿烟羽技术分析、湿烟羽治理工艺设计和实
随着国内经济全球化羽翼的日渐丰盈,现代工业化的迅速发展,出现了一批又一批的工业产品,在艺术家对工业产品的钻研下,赋予了它不一样的生命力,这样综合绘画被推向了一个高峰期。在现代化社会,综合性的绘画风格也越来越被大家所接受。随着材质的广泛运用,使得绘画的表现手法和寓意立体而饱满,画面感强烈,表达内容源自人们丰富多彩的生活,与夸张,变形,联想等表达手法相结合,形成了具有强烈美感和想象力的画面。没有任何约
时事新闻来源于生活实际,是整个地理学科教学比较普遍应用的教学辅助工具和校外课程资源。高中学习期间对于学习地理的宗旨是围绕“在生活中发现地理”、“学习新知识离不开地理”、“要端正的学习态度来学习地理、增强学习地理的主动性”等等,在日常生活中所出现的新的新闻热点都在不同层面渗透着地理知识,是学习好地理的一个好帮手,对于不同阶段的地理学习,新闻热点都是不可忽视的一个重要因素。本研究在梳理时事新闻、地理时
施工图设计阶段是决定工程价值的阶段,是确保工程在施工过程中按计划实施的必要条件,直接决定着最终建设工程的质量。BIM技术在我国发展的时间并不长,对于BIM技术的应用还不
毒死蜱作为一种全世界最广泛使用的有机磷杀虫剂,是农残分析中的重点检测对象,而其降解产物3,5,6-三氯-2-吡啶酚(TCP)的生物毒性比原药更大,所以在环境分析和食品安全检测等领
随着电力工业的发展和科学技术的进步,发电机组不断向着高参数、大容量的方向发展,自动化程度越来越高,也对发电机组操作人员的技术知识、操作技能和应变能力等方面提出了更