益气健脾方对一次力竭游泳后大鼠骨骼肌及CK影响研究

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目的本研究根据中医藏象学说、气血津液理论和中医筋伤理论,在中医整体观和辨证论治的指导下,采用传统方剂适当改进,观察一次力竭游泳大鼠后服用益气健脾方对其骨骼肌组织显微结构和血清中肌酸激酶变化,探讨益气健脾方对血清CK和骨骼肌显微结构的影响及其机理。方法实验对象:Wistar大鼠30只(雄性,体重200±20g,SPF级);益气健脾方(人参、白术、茯苓、炙甘草、盐、黄芪)。造模方法:在人工气候室内(环境温度23±4℃),用游泳方法造成一次力竭运动大鼠模型,为保证运动强度,缩短游泳时间,采用通常的负重(约为体重的约7%,注:200g大鼠为14g)方法来增加其运动量。分组:Wistar大鼠30只,随机分为3组:A组不染色(一次力竭性游泳运动空白对照组n=10),B组5%苦味酸染色(服生理盐水一次力竭性游泳运动安慰剂组n=10),C组甲紫染色(服中药一次力竭性游泳运动实验组n=10)。实验方法:大鼠在进行适应性饲养2天后,开始进行一周的适应性游泳训练,后进行一次力竭性游泳运动造模,造模完成后,分别给予A空白模型组2小时后放回笼中正常饲养, B安慰剂组和C服中药方剂组2小时后,分别给予生理盐水灌胃,益气健脾方汤药灌胃,12小时后给予第2次灌胃,在力竭性游泳运动完成后约1天后,全部大鼠采用4%戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉动物,先心脏采血后测定血清CK,同时随机取一侧腓肠肌,固定后,置备HE光镜切片。结果A组B组C组CK结果方差分析可以看到,当显著性水准为α=0.05时,结果为(P<0.05),3组间有统计学的意义。当显著性水准为α=0.05,并进行空白对照A组与C服中药方剂组实验组之间的t检验,显示(P<0.05),该差异是有统计学意义的。B安慰剂组与C服中药方剂组实验组之间的t检验,显示(P<0.05),该差异是有统计学意义的。而当显著性水准为α=0.05时,A空白对照组与B安慰剂组之间的t检验,显示(P>0.05)该差异是无统计学意义的。全部大鼠腓肠肌采用的是光镜HE染色切片结果3个组标本对比未见明显差异,标本异常仅仅限于骨骼肌的水肿,且水肿情况较轻微,其它结构未见异常。结论一次力竭性游泳后24小时恢复期内,大鼠血清CK值有明显升高,实验显示益气健脾方对血清CK活性有明显降低作用,可以推测其对骨骼肌具有促进恢复,防止损伤加重,保护骨骼肌的作用。本实验大鼠腓肠肌采用的是光镜HE染色切片结果3个组标本对比未见明显差异,标本异常仅仅限于骨骼肌的水肿,且水肿情况较轻微,其它结构未见异常。推测其可能为:1.一次力竭性游泳运动对大鼠骨骼肌的显微结构损伤较轻,本中药方剂对其损伤结构恢复情况影响较小,可能需要作进一步电镜比较本中药方剂对超微结构损伤的效果;2.本中药方剂对一次力竭性游泳后损伤的显微结构的修复无效果,有待进一步研究。
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