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随着环境激素类物质(EDCs)在水体的检出,对水生态环境生态系统的危害影响日益受到高度关注。摇蚊作为水一沉积物系统中典型模式生物,对环境因子变化的极其敏感,所以本文选取双酚类化合物双酚S(BPS),对摇蚊分子生物学水平(细胞水平、蛋白水平、基因水平)和个体水平的早期响应和全生命周期毒性响应影响情况进行研究,为建立EDCs快速检测方法提供技术支持,阐明BPS的环境内分泌干扰特性。具体研究结果具体如下: (1)本研究从通过对伸展摇蚊的各个形态的观察,分析了伸展摇蚊幼虫头壳宽度和龄期的关系。摇蚊幼虫一到四龄期的头壳宽度(x)和摇蚊的各个龄期(y)的关系可以绘制用如下的线性方程描述:y=90.6x-9.5(R2=0.98,P=0.01<0.05),说明两者之间有呈现显著的线性相关性。 (2)对伸展摇蚊的卵和幼虫分别进行72h和48h的BPS暴露,对卵的72h-EC50为19.74mg/L,对一龄期和四龄期幼虫48h-EC50分别为11.47mg/L和21.11mg/L,表明一龄期幼虫受外界条件影响比摇蚊的卵的变化更大,一龄期幼虫最为敏感。 (3)伸展摇蚊体内的唾腺染色体受BPS高浓度影响。BPS可能通过刺激摇蚊分泌蜕皮激素从而诱导第Ⅰ染色体产生膨突;第Ⅱ染色体和第Ⅲ染色体发生染色体臂内倒置;对第Ⅳ条染色体的不同部位产生结构畸形(部分缺失、出现绒球状染色体)和功能畸形(着丝粒加深);而第Ⅳ条染色体中的BRs(巴尔比尼氏环)对BPS并不敏感,所以BPS可能对摇蚊筑巢行为的干扰不大。 (4)24h的BPS暴露下摇蚊抗氧化酶活的变化,CAT(过氧化氢酶)和SOD(超氧化物歧化酶)活性均受到显著诱导,且变化趋势一致,两者酶活之间呈现极高的正相关性,说明SOD和CAT作为第一道保护酶系统的协调性。GST(谷胱甘肽转移酶)的活性受到抑制,破坏了摇蚊的防御系统,显著增强了BPS对摇蚊幼虫的毒性。 (5)BPS短期暴露后,对摇蚊基因标志物进行测定。摇蚊卵和四龄期幼虫的基因均受到影响,卵期的4个基因(Hsp70、Hb B、EcR、USP)在BPS的诱导下表达量与空白对照组相比均呈现显著的上升,其中Hsp70基因最敏感,但幼虫体内usp基因的未能显著表达,可见卵比摇蚊幼虫更敏感。刺激卵以及幼虫中Hb B基因超表达,可能与摇蚊代谢BPS时的需氧量增加有关。都能诱导EcR基因显著上调,所以推测BPS能够干扰摇蚊的蜕皮激素调控系统,BPS可能属于环境内分泌干扰物。 (6)通过BPS水体加标法摇蚊全生命周期实验证实,基于P代总羽化率的NOEC为1.098mg/L。对F1代的雄性和总体羽化率的NOEC为0.304mg/L,雌性和总体的发育率和雌性比值的NOEC均为1.443mg/L。而摇蚊23d-LC50值分别为P代:4.124mg/L(2.764-10.987),F1代:1.350mg/L(1.202-1.537),BPS可能对控制摇蚊子代繁殖发育的一些关键的因素产生进一步的毒性累积,干扰子代的成长,说明F1代比P代对BPS更敏感。且BPS能诱导了F1代的雌性摇蚊发育率的显著上升,影响其性别分化,使得羽化摇蚊雌性数量增多,进一步说明BPS可能具有雌激素效应。