糖皮质激素和苯并(a)芘对大鼠海马神经元的影响

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早老性痴呆的主要病理改变之一是海马脑区β-淀粉样蛋白的沉积,而β-淀粉样蛋白会造成海马神经元会损伤。糖皮质激素为应激激素,也是临床常用药物,血浆中高水平的糖皮质激素持续作用可透过血脑屏障进入脑组织。在中枢神经系统中,海马富含糖皮质激素受体,故极易受到糖皮质激素的攻击。因此对于早老性痴呆病人,体内高水平的糖皮质激素水平是否会加重β-淀粉样蛋白引起的海马神经元损伤有待研究。 目的 在体外实验条件下,观察不同浓度的地塞米松和β-淀粉样蛋白对海马神经元的影响,以探讨糖皮质激素是否促进β-淀粉样蛋白对海马神经元的损伤。 方法 取孕18天SD大鼠胚胎的海马神经元进行体外原代分离培养,在细胞增长期分别加入不同浓度DEX(10-5,10-6,10-7,10-8M)和Aβ25-35(1,5,10,20μM)作用24h后,遴选出接近损伤浓度和最低致损伤浓度用于联合实验。于联合实验中先加入DEX作用24h后,再加入Aβ25-35作用24h后观察损伤情况。应用倒置显微镜、MTT法和LDH释放率法进行细胞形态及细胞活力分析;运用TUNEL法检测海马神经元的凋亡情况,观察其凋亡特征。 结果 MTT OD值和LDH释放率检测发现10-5 M DEX作用组和5,10,20μM Aβ25-35作用组与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。DEX(10-5,10-6M)和Aβ25-35(1,5μM)联合组,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05)。TUNEL法检测显示正常培养的海马神经元TUNEL染色偶见阳性细胞(凋亡率为7.83±1.65%),DEX(10-5,10-6
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