吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)是含亚铁血红素的单体蛋白质类酶,生物学功能主要是催化L-色氨酸(L-Trp)吲哚环的氧化裂解,作用于L-Trp沿犬尿氨酸通路(KP)代谢的第一步,此通路在肿瘤的免疫抑制功能中发挥重要作用。作为KP中的首个限速酶,IDO1主要通过两种机制发挥免疫抑制功能:一个是促进L-Trp的消耗,使T细胞增殖受到阻滞,并促进T细胞分化成调节性T细胞;一个是活性代谢物的累积,犬尿氨酸(KYN)代谢物能够与芳香烃受体(AhR)结合激活信号通路,增强免疫耐受,并且累积的代谢产物的毒性会引起T细胞的凋亡。另外,IDO1也可以通过非酶作用参与免疫调节,这也是IDO1介导肿瘤免疫抑制的一个重要方式。因此,随着肿瘤免疫疗法的到来,研究并开发IDO1抑制剂用于肿瘤治疗也越来越成为研究热点。经过近几十年科学研究者们不懈的努力,合成了大量的IDO1抑制剂,目前处于临床阶段的抑制剂主要有Indoximod、GDC-0919、INCB024360、BMS-986205和PF-06840003等。本文以目前处于临床阶段的抑制剂INCB024360为先导化合物,仔细研究INCB024360与IDO1酶复合物的晶体结构,采用骨架跃迁和结构修饰,合成了两类共10个小分子IDO1抑制剂。所有的化合物均测定熔点并采用~1H NMR和MS手段确证。抑制剂分别在酶水平和细胞水平测定对IDO1的抑制活性并且用MTT比色法测定两类抑制剂化合物对HeLa、MDA-MB-231、B16F10三种癌细胞的细胞毒活性。结果显示:这些化合物对HeLa细胞均有较好的细胞毒活性,尤其M3、M9对三种癌细胞都有很强的杀伤作用;另外化合物M8、M9、M10的酶活性均达到了纳摩尔级,其中M8、M9的抑制酶活性高于阳性对照物GDC0919,值得深入研究。这些实验结果对进一步的设计合成具有高活性的小分子IDO1抑制剂提供了依据和参考意义。