流感病毒是能感染禽、人造成高致死率的一种病原，并可造成大的流行。禽流感不仅给世界养禽业造成了巨大的经济损失，而且对人类健康和生命安全构成了严重威胁。为了更好的防治禽流感，需要对病毒的复制、致病性以及病毒对宿主免疫应答等分子机制进行更好的研究。HA作为流感的重要蛋白，对其研究已有一定深度，但对H5亚型高致病性禽流感HA分子免疫机制的研究还不是很清楚。 本研究利用PCR方法从实验室已构建好的带有H5亚型禽流感病毒HA全长基因的质粒pMD1-H5HA中扩增HA和HA1基因。把HA和HA1基因分别亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1和pcDNA4.0中，经PCR、双酶切和测序鉴定，证明成功构建了重组真核表达质粒pEGFP-HA，pEGFP-HA1和pcDNA4.0-HA。将pEGFP-HA和pEGFP-HA1转染至BHK-21和293T细胞中，24～48小时后，分别在荧光显微镜下看到荧光，证实HA融合绿色荧光蛋白(GFP)得到了表达。经Westerm-blot检测证实，HA基因在以上两种细胞中能够表达。 为了对H5亚型禽流感病毒HA基因功能进一步研究，本试验将pEGFP-HA和pEGFP-HA1分别与IL-12p40-promoter-pG1和pNF-K B-luc报告基因载体共转染至293T细胞中，检测报告基因-荧光素酶基因表达情况。试验结果显示，与空载体pEGFP-N1对照组相比，HA基因的表达促进了IL-12p40的表达，激活了核转录因子NF-κB。 本研究构建了H5亚型AIV HA基因的真核表达质粒，在真核细胞系中得到了表达，并初步研究了HA基因的功能，为进一步研究H5亚型禽流感病毒HA基因对先天性免疫功能的影响奠定了基础。