铁皮石斛(Dendrobium Candida)为兰科石斛属多年生草本植物。作为传统中药,铁皮石斛经多年证实有显著的功效。经证明,铁皮石斛可以抵抗免疫力低下、减缓衰老、减轻自由基的氧化作用,可以一定程度上治疗劳累病、肾病、糖尿病。此外,铁皮石斛具有浸润肺部、口腔生津、滋养脾胃的作用。石斛多糖是铁皮石斛中促进免疫和抗肿瘤作的主要成分。近年来,关于铁皮石斛多糖的提取方法有很多。利用单因素试验设计和正交试验设计方法,研究温度、粉碎样大小、时间、C02流量等对于最终结果萃取率的影响,并且优化出最适工艺参数。同时对铁皮石斛提取物进行成分分析,并且最终应用到小鼠体内,以小鼠的体重变化、免疫器官指数、外周血白血细胞数为指标,对铁皮石斛资源的综合利用提供了理论依据,对铁皮石斛多糖的免疫调节功能分析。1.超临界CO2萃取铁皮石斛叶工艺的研究和提取物成分分析超临界CO2的关键工艺参数,如压力、时间、温度、C02流量、粉碎粒度决定铁皮石斛叶多糖最终得率结果。在查询相关资料和文献指导的背景下,本试验的重要环节设备分离器的压力和温度为：分离器I和分离器II的压力为100～103bar、43～46bar;温度为40℃、35℃。经过单因素试验和正交试验,我们最终得到的最优工艺参数是：粒径控制在40-60目,在250bar压力,45℃的温度下,萃取90min,控制CO2流量20L/h,得到铁皮石斛叶提取液的最大萃取得率可以达到5.2%。经过萃取技术得到的是铁皮石斛叶的提取物。为了证明该提取物的主要有效成分,我们采用苯酚-硫酸法对其中的石斛多糖成分进行测定,证明了石斛多糖其是主要成分,并进行了精密度、稳定性、重现性试验。采用比色法法测定多糖含量,稳定性、精密度、重现性试验结果的相对标准偏差均小于5%。利用气质联用技术,测定铁皮石斛提取物中含有一定量的脂肪酸：十八烷酸、棕榈酸、亚油酸和其他物质。最终得到去除蛋白和色素等杂质的铁皮石斛粗多糖(DCP)的质量分数为41.77%。2.铁皮石斛叶对小鼠免疫功能的影响铁皮石斛提取物从特异性、非特异性免疫方面对小鼠增加免疫力有显著地促进作用。本试验给昆明SPF级小鼠注射环磷酰胺,造成小鼠免疫力低下模型。与对照比较,添加铁皮石斛粗多糖(DCP)的用药组能够显著改变因致免疫低下造成的小鼠的生长缓慢,脾脏指数显著性差异,但是胸腺指数差异不显著。在小鼠的血液理化指标方面,用药组可以减缓免疫力低下小鼠的外周白细胞数的下降和促进正常小鼠外周白细胞数的增加。此外,铁皮石斛粗多糖(DCP)能增加免疫力小鼠低下组中小鼠血清中IL-2、 IFN-γ水平,维持在正常组水平。