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现代植物病毒学的发展历经了几百年,新时代的农业生产要求越来越高,但是形势却趋于复杂。这要求植物病毒检测手段以及操作方法要快速、灵敏、准确与简便。其中血清学检测方法就是众多检测方法中的一种行之有效的检测技术。本研究针对目前国内发生较为频繁的三种植物病毒病,利用病毒外壳蛋白原核表达的方法制备多克隆抗体,并建立了相应的病毒检测体系,以用于后续三种病毒的检测鉴定工作。番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)是长线形病毒科(Closteroviridae)毛形病毒属(Crinivirus)的成员。其基因组是二分体线形正单链RNA,外壳蛋白基因位于RNA2上。ToCV寄主种类多种多样且覆盖范围广泛,全世界范围内都曾暴发流行,造成严重的经济损失。由于其传毒媒介的广泛性,以及感病植株初始症状的不明显,导致了其难以防治。鉴别ToCV的方法有多种,大致有目测法、RT-PCR检测方法、组织印迹杂交法及血清学检测方法。本研究利用山东寿光田间采集的病样,利用RT-PCR的方法将扩增的病毒外壳序列与载体连接来构建番茄褪绿病毒外壳蛋白基因表达载体,用原核表达纯化过的重组蛋白作为抗原,多次免疫兔子的方法制备获得其多抗血清,收集的血清进一步进行效价的检测。确定血清效价后,可以运用Western blot的方法去检测病样,以确定血清的特异性。最终结果显示,该多抗血清的效价为1:50,并具有一定的特异性。对ToCV的田间检测鉴定具有实际应用价值。菜豆普通花叶病毒(Bean common mosaic virius,BCMV)是属于马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的,它在全球都有分布。其基因组结构也是具有Potyvirus基因组结构特征,病毒的基因组只有一条链的RNA。BCMV的传播途径有很多种,蚜虫、种子、花粉、机械等等都是病毒的传播方式。本研究的毒源来自于山东济宁的田间病样,构建外壳基因的表达的载体,同样的方法表达纯化蛋白免疫兔子获得血清测定效价。该血清的效价测定结果为1:1000。同时,Western blot检测BCMV的的结果也能够证明该血清具有特异性,可实际运用于BCMV的检测鉴定。辣椒褪绿病毒(Capsicum chlorosis virius,CaCV)是番茄斑萎病毒属(Tospovirus)的一个暂定种,属于西瓜银色斑驳病毒(Watermelon silver mottle virus,WSMoV)血清组。首先是澳大利亚报道出发现该病毒,随后泰国、印度接连报道发现其侵染情况发生,直至大范围内发现病害传播暴发。本研究中运用的生物材料是从广东省采集的蜘蛛兰病样,RT-PCR检测确定为辣椒褪绿病毒后构建其病毒外壳原核表达的载体,并通过免疫新西兰雄兔制备了多克隆抗体。最终获得的多抗血清效价为1:20000,Western blot检测CaCV的结果也表明该血清具有较好的特异性,可运用于该病毒的检测鉴定。