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背景:慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是一种具有浸润性的血液系统恶性克隆性疾病,约占成人白血病的20%。大部分CML患者含突变的致癌性BCR-ABL融合基因,其促进细胞过度增殖、改变细胞迁移侵袭能力、使凋亡受抑制、干扰细胞分化等。K562细胞株具有肿瘤干细胞特征,且BCR-ABL表达阳性,是研究CML理想细胞模型。Lnc RNA119766为长链非编码RNA((long non-coding,lnc RNA),影响基因转录、转录后加工,细胞凋亡及分化。本组前期发现:膜联蛋白A11(ANXA11)和信号接头蛋白CRKL下调抑制K562体外增殖、迁移、侵袭等恶性行为,促进K562细胞向红系和巨核系分化;基因芯片结果表明在CRKL和ANXA11下调的sh RNA-CRKL-和sh RNA-A11-K562细胞株中,Lnc RNA119766水平分别下调84.6%和82.1%,表明其表达水平变化与K562恶性行为乃至CML病变有关,但目前尚未见报道。目的:1.检测Lnc RNA119766在CML患者骨髓样本中表达水平及其与CML的临床相关性;2.Lnc RNA119766水平下调对K562细胞转移能力的影响;3.Lnc RNA119766过表达对K562转移和分化能力的作用及机制。方法:1.q PCR法检测Lnc RNA119766在33例CML初发患者样本,14例正常人样本中的表达水平,比较CML病人在初发及完全缓解(CR)情况下血液样本中Lnc RNA119766表达变化。2.采用si RNA瞬时转染法下调Lnc RNA119766在K562细胞中表达,q PCR法检测下调效率;台盼蓝计数法检测Lnc RNA119766下调对K562细胞增殖能力的影响;Transwell法检测Lnc RNA119766下调对K562细胞迁移和侵袭能力影响。3.构建p CDH-CMV-MCS-EF1-puro-Lnc RNA119766质粒,瞬时转染至K562细胞,q PCR法检测其上调水平;台盼蓝计数法检测Lnc RNA119766上调对K562细胞增殖能力的影响;Transwell法检测Lnc RNA119766上调对K562细胞迁移和侵袭能力的影响;q PCR法检测Lnc RNA119766上调对K562向红细胞和巨核细胞分化标志分子表达水平变化;WB法检测Lnc RNA119766上调对K562细胞中MMP-2和TIMP-1水平的变化。结果:1.与正常组样本相比,Lnc RNA119766在CML初发患者骨髓样本中表达升高;在配对患者样本中,与初发诊断时相比,患者完全缓解(CR)后血液样本中Lnc RNA119766水平“回复”。2.si RNA瞬时转染至K562使Lnc RNA119766下调87.5%(P=0.0008);Lnc RNA119766下调使K562细胞体外增殖、迁移和侵袭能力分别降低46.19%(P=0.0094),55.3%(P=0.0006),48.3%(P=0.0011)。3.成功构建p CDH-CMV-MCS-EF1-puro-Lnc RNA119766表达质粒,转染K562细胞后,Lnc RNA119766上调1254倍(P=0.0037)。4.Lnc RNA119766上调使K562体外增殖、迁移和侵袭能力分别升高36.6%(P=0.0130),15.7%(P=0.0283),32.7%(P=0.0069);使红细胞表面标志分子GPA和γ-globin的m RNA水平分别降低12.3%(P=0.0004)和18.8%(P=0.0452);使巨核细胞表面标志分子CD41和CD61的m RNA表达分别降低14.3%(P=0.0089)和35.1%(P=0.0071);MMP-2蛋白水平升高1.2倍(P=0.03),TIMP-1蛋白水平降低24%(P=0.042)。结论:1.Lnc RNA119766高表达与CML临床病变相关,其水平变化可潜在作为CML患者治疗的监测分子。2.Lnc RNA119766下调抑制K562细胞转移能力。3.Lnc RNA119766上调抑制K562细胞向红系和巨核细胞分化能力,促进其体外恶性行为。4.Lnc RNA119766通过增强MMP-2和抑制TIMP-1表达水平,促进K562细胞的恶性行为。