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背景:胸腔积液(pleural effusion,PE)是多种原因导致胸膜腔出现的过多液体,常继发于肺和胸膜疾病,及时准确的胸腔积液性质鉴别对疾病的诊疗至关重要。在我国,原发性肺癌以及肺结核是导致胸腔积液的首要原因。近20%的患者在胸腔积液常规生化、胸部X线、CT甚至细胞病理学检查后,仍然不能明确病因。而作为胸腔积液性质鉴别诊断“金标准”的胸腔镜或胸膜活检等侵入性操作手段,诊断准确率高,但创伤大、风险高,患者依从性较差。目前,国内外关于胸腔积液的性质鉴定高水平研究指标有白介素、CEA、内皮素等可溶性物质,但这些可溶性物质有来源多元化、缺乏溯源性、性质不稳定、检测敏感度和特异度有限等诸多不足,即使联合应用也难有满意效果。外泌体是活细胞分泌的纳米级囊性微泡,可以通过物理阻隔及RNA沉默复合体(RISC)中的Ago2复合物相结合,避免了RNA酶的消化,在一定程度上增强了它所携带的miRNA、mRNA等生物活性分子的稳定性。因此,外泌体miRNA作为诊断标志物,具备性质稳定、含量较高、有溯源性以及无创检测等优势。本研究拟收集不同性质胸腔积液的外泌体,筛选其中可作为肺腺癌及肺结核胸腔积液性质鉴别的特征性外泌体miRNA谱,分析探讨此外泌体miRNA在胸腔积液诊断上的临床应用价值。目的:筛选胸腔积液性质相关特征性外泌体miRNA谱,为临床快速、准确的鉴别胸腔积液提供重要手段。方法:收集三种性质的胸腔积液(肺腺癌、肺结核以及炎性)并提取外泌体;根据标本来源分组送检外泌体miRNA,通过小RNA深度测序筛选出组间差异表达miRNA;接着分析整理差异miRNA进而确定具有临床鉴别诊断价值的miRNA谱;最后,运用基于SYBR荧光染料的实时荧光定量PCR技术对筛选出来的特征性miRNA谱进行临床验证。结果:(1)成功收集并提取到不同性质胸腔积液的外泌体;(2)小RNA深度测序结果显示肺腺癌性、结核性以及炎性胸腔积液的外泌体miRNA组间比较均存在显著差异,并且存在特征性miRNA组合(miR-483-5p、miR-205-5p、miR-375、miR-200c-3p、miR-429、miR-200b-3p、miR-200a-3p、miR-203a-3p、miR-141-3p、miR-148a-3p、miR-451a、miR-150-5p),可以很好的对三种性质胸腔积液进行鉴别诊断;(3)除外miR-205-5p、miR-148a-3p,其他miRNA在荧光定量PCR中的表达趋势与小RNA测序结果一致。结论:本研究通过应用小RNA测序技术,全面地分析不同性质胸腔积液外泌体所携带的miRNA,并结合荧光定量PCR验证技术,最终初步筛选出特征性miRNA谱,为胸腔积液的鉴别诊断提供新的方向。