【摘 要】
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生物膜结构为细菌提供了抵御恶劣环境的条件,并使这些聚集的细菌能够适应并在各种环境中正常生存和繁殖,这就导致细菌的耐药性以及传染性大幅增强,普通的灭菌方法已经无法满
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生物膜结构为细菌提供了抵御恶劣环境的条件,并使这些聚集的细菌能够适应并在各种环境中正常生存和繁殖,这就导致细菌的耐药性以及传染性大幅增强,普通的灭菌方法已经无法满足现阶段的要求。低温等离子体释放出的包含各类自由基、带电粒子、激发态粒子等的紫外线(UV)辐射,诱导细菌脂质、蛋白质、DNA等的破坏,导致细胞结构的退化。本文研究了大气压脉冲电源等离子体氦气射流对耐药性鲍曼不动杆菌生物膜的灭活机制及对其再生能力的影响。通过细菌的形态变化、可培养发育能力、新陈代谢能力、胞内活性氧和膜完整性等表征手段检测细菌的灭活效果。在鲍曼不动杆菌生物膜培养期结束时,生物膜中细菌总数达到7.37±0.16log10CFU/ml。等离子体处理30分钟后,生物膜中约99.9%的细菌失去其可培养发育能力。同时,刃天青荧光染色方法显示约80%的细菌失去了新陈代谢能力,部分细菌进入了一种存活但不可培养发育的状态(VBNC),SYTO 9/PI荧光染色方法显示,约38.2%的生物膜细菌已经失去细胞膜结构的膜完整性,H2-DCFDA荧光染色方法显示,等离子体处理后生物膜中细菌内的活性含氧基团(ROS)的浓度有所提高。在对等离子体处理后鲍曼不动杆菌的再生能力的研究中,再生后细菌生长可达到的最大总数是5.36±0.2 log10 CFU/ml,与初代的细菌总数相比,大约有99.99%的细菌被抑制,与初代生物膜中细菌的生物量相比,再生后细菌的生物量下降至(11±0.010)%,当等离子体处理30分钟时,具有新陈代谢能力的细菌百分比降至52.9%。这就表明大气压等离子体射流不仅可以有效的灭活生物膜中的细菌,并且对其有长期抑制效果。
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