黄芩有效成分提取及纯化工艺的研究

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黄芩是一种具有重要药理作用的天然药用植物,黄芩所含的黄酮类物质尤其是主要活性成分黄芩苷和黄芩素都具有广泛的生理活性,如:清热解毒、镇静、降压、神经保护等药理作用。本文以陕西产渭南黄芩(黄芩苷含量10.4%)为材料,从节约原材料、降低生产成本及提高产能等方面着手,研究黄芩苷和黄芩素的工艺条件。主要研究内容如下:(1)确定了黄芩苷的最佳提取工艺条件。通过比较水提法、醇提法和超声提取法,以黄芩苷得率和含量为指标,用单因素实验对黄芩苷提取条件进行探讨。经过方法比较、条件选择,确定出黄芩苷提取的最佳工艺条件:黄芩干燥根经粉碎后过60目筛,加10倍量水煎煮3次,每次1.5h。再通过加酸和保温可以得到黄芩苷粗提物,最佳条件为:加HCl调节pH1-2,80℃保温30min,静置6h。结果表明水提法产率高,成本低,适合工业化生产,将其定为最佳提取工艺。(2)确定了黄芩苷的最佳纯化工艺条件。利用粗提物中杂质与黄芩苷在溶剂中的溶解性不同将其除去。最佳工艺条件为:加3倍体积于碱液的90%乙醇,静置2-3h,黄芩苷即可析出,再通过无水乙醇进行重结晶,黄芩苷含量可达91.45%,得率达9.5%。(3)确定了黄芩素酶解的最佳工艺条件。本文首次提出通过酶转化黄芩苷为黄芩素的方法,该法克服了传统酸水解法和热裂解法的缺点。本文首先考察了两种液体酶:诺维信复合植物水解酶和诺维信复合纤维素酶两种液体酶,并分别确定了其工作条件。液体酶不易保存,因而进一步考察固体纤维素酶,并确定其最适工作条件:对1.0g黄芩苷而言,最适加入量为160u,温度60℃,pH6.0,反应时间3h。黄芩素纯度经过UV法测定达到82.3%,酶解率达到90.6%。(4)利用红外光谱法和紫外分光光度法分别对黄芩苷和黄芩素进行了定性定量分析。从黄芩苷标准品和样品的红外谱图上可以看到黄芩苷主要共有特征峰为:3495cm-1、3407cm-1、2926cm-1、1726cm-1、1662cm-1、1608cm-1、1572cm-1、1493cm-1、1369cm-1等;而黄芩素主要共有特征峰为:3412cm-1、3092cm-1、1658cm-1、1619cm-1、1584cm-1、1505cm-1等,表明它们含有相同或相似的成分,可以此分别作为黄芩苷和黄芩素定性分析依据。利用紫外分光光度法测定黄芩苷和黄芩素的吸光度,通过外标法分别确定所得产品的含量。
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