Mucin16(简称MUC16)是一种跨膜蛋白，为Mucin家族成员之一。在卵巢癌和其他癌症中，其胞外部分可以被剪切释放到胞外基质或血清中，因此成为癌症诊断，尤其是卵巢癌诊断中的重要检测指标。胞外部分也称为糖类抗原125(CA125)。MUC16在癌症发生过程中的作用尚待进一步探索。已有研究表明MUC16可能直接或间接参与肿瘤生长信号通路，进而影响肿瘤的生长和迁移。本课题研究目的是制备出抗MUC16的单克隆抗体，作为日后研究MUC16生物学功能的工具，同时建立双抗体夹心ELISA检测MUC16的方法。此外，本课题还对MUC16和其它蛋白的相互作用进行了初步分析，以便进一步研究MUC16的功能。　　本实验室从卵巢癌细胞扩增出MUC16基因的片段，将其连接到原核生物表达载体上，转入大肠杆菌表达出MUC16片段的融合蛋白，以此为抗原进行单克隆抗体制备，获得一些特异性的抗MUC16的单克隆抗体。本课题对这些抗体进行初步的配对实验，挑选出可配对的MUC16抗体，进行建立双抗体夹心ELISA方法的探索，绘制检测标准曲线，并对该法的灵敏度、稳定性和特异性进行鉴定。为未来应用于临床检测病人血清打下基础。　　MUC16已经在临床上用于癌症进展的监测，但是其在癌症发生过程中的功能尚不清楚，和其相互作用的蛋白知之甚少。因此，对MUC16的生物学功能探索也是本实验室的研究重点。本课题探讨了MUC16和其它蛋白的相互作用，接下来希望通过相互作用的研究进一步阐明MUC16的功能和定位。通过GSTPull-down实验发现了Axin蛋白和MUC16之间可能存在的结合。免疫共沉淀和免疫荧光共聚焦实验进一步表明MUC16和Axin蛋白在细胞内可以相互作用。最后确定了Axin蛋白上对于结合MUC16必要的一段序列。初步证实了两者有相互作用。