减毒病毒CHV1在植物细胞与真菌细胞中的跨界传播

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真菌细胞内存在着种类诸多的病毒或病毒类复制因子,统称为真菌病毒。少部分真菌病毒能够抑制寄主真菌的致病能力,引起病原菌致病力衰退。由于真菌病毒具有弱毒的特性,是一种重要的生防菌资源,因而受到了国内外植保科学研究者的广泛关注。自然界中真菌病毒的传播途径主要通过真菌菌丝融合进行水平传播,或者通过分生孢子进行垂直传播。然而,病原真菌常发生营养体不亲和反应,营养体不亲和性菌株在菌丝接触时会诱导细胞发生程序性死亡,阻碍真菌病毒在不同菌株中扩散,进而影响了真菌病毒的生防效果。为明确真菌病毒是否可以感染植物细胞,以植物为介体在真菌和植物间跨界传播。本研究利用真菌-植物-病毒互作研究体系得出以下结论:1.分别筛选了4种真菌病毒,包括减毒病毒属(Hypoviridae)的两个病毒:板栗疫病菌减毒病毒1(Cryphonectria hypovirus 1,CHV1)和链格孢菌减毒病毒1(Alternalia atanata hypovirus 1,Aa HV1),及葡萄座腔菌病毒1(Botryosphaeria dothidea virus 1,Bd V1)和ds RNA线粒体真菌病毒立枯丝核菌线粒体病毒328(Rhizoctonia solani mitovirus 328,Rs MV-328)。分别提取4种病毒的遗传物质,摩擦接种至模式植物普通烟植株上,分析其侵染复制情况。结果发现CHV1和Aa HV1能够在接种叶中复制但不能系统性运动,而Bd V1和Rs MV-328则不能侵染普通烟。2.当CHV1分别与植物病毒PVX、PVY、CMV、TMV等复合侵染时,CHV1可进行长距离系统性运动,说明植物病毒可以协助CHV1在植株中进行系统性扩散。3.当CHV1摩擦接种组成型表达TMV运动蛋白30K的转基因烟草(普通烟-30K)植株时,发现CHV1可在TMV运动蛋白30K存在条件下进行系统性侵染,此研究结果进一步说明植物病毒的运动蛋白可以协助真菌病毒CHV1在植物中进行长距离系统性运动。4.发现TMV与CHV1复合侵染时,在植物寄主普通烟中,TMV促进了CHV1的侵染和复制;在真菌寄主(Fusarium graminearum)中,CHV1增加了TMV的侵染和复制,说明植物病毒TMV和真菌病毒CHV1之间存在着条件性的协同互作。5.将真菌与病毒复合接种寄主植物普通烟植株上,检测发现在TMV存在条件下,CHV1可从真菌传播到整株植物,并且能够以此植物为介体传播至侵染植物的其他真菌寄主中。同样,在CHV1存在的情况下,真菌捕获植物病毒TMV的效率也大大提高。此结果进一步表明,植物病毒和真菌病毒之间存在着寄主依赖性的协同互作,彼此促进彼此的跨界感染。本研究揭示了自然界中存在着植物与真菌互作介导的病毒传播途径,同时为真菌病毒的胞外传播提供了新的实验证据,表明真菌病毒能够感染植物,并以植物为媒介,经植物载体在共侵染的植物病原菌群中进行传播,从而实现利用减毒真菌病毒防治植物病原真菌的目的,为突破真菌病毒生防技术瓶颈提供了一种可能。
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